蛋白图谱法鉴别半夏、水半夏和掌叶半夏的实验研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tai_2036580
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目的:利用SDS-PAGE、Tricine-SDS-PAGE和双向电泳法,鉴别半夏、水半夏与掌叶半夏。  方法:通过聚乙烯吡咯烷酮法(PVP)、三氯醋酸-丙酮法(TCA)、植物蛋白提取试剂盒法和植物蛋白提取专利法(BPP)四种方法,提取鲜品半夏和水半夏总蛋白质及干品半夏、水半夏和掌叶半夏的总蛋白质。将所提蛋白质进行 SDS-PAGE、Tricine-SDS-PAGE。以TCA法所得3种样品干品总蛋白质进行双向电泳。  结果:对干、鲜品而言,所提蛋白浓度均是剂盒法最高,BPP法最低,TCA法仅次于试剂盒法。SDS-PAGE结果显示半夏鲜品和水半夏鲜品有3条共有条带(55 KDa、22 KDa和12 KDa),半夏有1条特有条带(105 KDa),水半夏有4条特有条带(60 KDa、43 KDa、36 KDa和32 KDa);干品半夏和水半夏有4条共有条带(55 KDa、36 KDa、22 KDa和12 KDa),半夏有2条特有条带(74 KDa和18 KDa)。  Tricine-SDS-PAGE结果显示鲜品半夏和水半夏有3条共有条带(55 KDa、24 KDa和11 KDa),半夏有2条特有条带(29214 Da和13548 Da),水半夏有1条特有条带(43 KDa)。半夏和水半夏干品有4条共有条带(36 KDa、25 KDa、15 KDa和11 KDa),分别有2条特有条带(半夏:14736Da和7680Da;水半夏:41977 Da和17200Da);半夏和掌叶半夏有4条共有条带(25 KDa、18 KDa、11 KDa、9 KDa),掌叶半夏有2条特有条带(29 KDa和5 KDa),半夏有1条特有条带(36 KDa)。  双向电泳图谱显示,半夏、水半夏和掌叶半夏在低pH处中等分子量和低分子量存在差异蛋白质。  结论:SDS-PAGE图谱、Tricine-SDS-PAGE图谱和双向电泳图谱,能在一定程度上鉴别半夏、水半夏和掌叶半夏。
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