【摘 要】
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骨骼肌是肉用家畜的主要器官之一,重量可占动物总体重的40%。肉嫩度是衡量肉品质的重要指标之一,其在很大程度上取决于肉中胶原含量以及胶原交联程度。研究骨骼肌胶原沉积及
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骨骼肌是肉用家畜的主要器官之一,重量可占动物总体重的40%。肉嫩度是衡量肉品质的重要指标之一,其在很大程度上取决于肉中胶原含量以及胶原交联程度。研究骨骼肌胶原沉积及其自身发育机制对于改善羊肉品质有重要意义。本试验旨在研究不同饲喂水平对绵羊骨骼肌发育及胶原沉积的影响。试验随机选取12只3月龄、体重20kg左右的杜泊×小尾寒羊杂交一代公羔羊,按完全随机设计分为两组。其中,对照组按照NRC提供的肉羊营养需要标准进行饲喂;限饲组日粮供给量为对照组的65%。绵羊体重达到35 kg时,屠宰采样。为了研究不同饲喂水平下骨骼肌发育情况,我们利用H&E染色对肌纤维大小分布、横截面积进行直观检测。此外,通过羟脯氛酸法和Masson Trichrome染色分析了半健肌胶原沉积情况,为了进一步验证胶原沉积对骨骼肌嫩度的影响,我们检测了骨骼肌的剪切力。最后运用Real-Time PCR、western blotting技术对骨骼肌发育及胶原沉积过程中相关调控蛋白和基因的表达量进行检测,旨在阐明不同饲喂水平对骨骼肌发育及胶原沉积的影响机制。研究结果显示,限饲组终体重和骨骼肌重量极显著降低(P<0.01),肌纤维大小及纤维面积均显著降低(P<0.05)。IGF-1mRNA的表达量显著降低(P<0.05),而IGF-2 mRNA表达量未现差异。限饲极显著降低phosphor-Akt、phosphor-mTOR、phosphor-4EBP1 和 phosphor-p70 蛋白含量(P<0.01)。此外,MyostainmRNA 和蛋白表达均显著升高(P<0.05),且MAFbx、MuRF1基因表达量显著增加(P<0.05)。限饲条件显著提高了 Warner-Bratzler剪切力(P<0.05)。Masson三色染色和羟脯氨酸测量结果均表明限饲组绵羊骨骼肌中胶原含量显著上升(P<0.05)。此外,限饲组肌肉中的 cotlagen I和fibronectinmRNA表达量显著升高(P<0.05),而 collagen Ⅲ mRNA的表达量未现显著差异(P>0.05)。相对于对照组,限饲组P4HA表达水平极显著升高(P<0.01),而LO和LH2b mRNA的表达水平差异不显著。限饲虽未改变MMP家族基因的表达量,但TIMP1、2表达量显著增加(P<0.05)。另外,TGF-β和Smad蛋白含量未有显著差异,而phosphor-p38蛋白含量显著升高(P<0.05)。综上,限饲对骨骼肌发育及胶原沉积的影响分别是通过PI3K/Akt和p38信号通路实现。
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