本试验按照GenBank中发布的ORFV的VIR基因序列设计2对引物(一对外引物F3、B3和一对内引物FIP、BIP)。利用基因提取试剂盒提取ORFV的D NA,用外引物对ORFV的VIR基因进行序列扩增,使用紫外凝胶成像仪观察结果,对所得正确条带进行胶回收,之后将含有VIR目标序列的部分基因克隆后载入T载体,为后续的一系列检测实验提供阳性物质。利用所设计的2对引物,以ORFV的VIR基因为模板进行序列扩增。建立检测ORFV的环介导等温扩增法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,同时优化LAMP的反应条件。试验利用反应条件优化后的LAMP对ORFV进行检测。对检测结果的阴阳性的区分采取了显色反应,之后进行了特异性、灵敏性实验和临床检测。结果显示,利用优化后的LAMP显色法,阳性组呈现黄色,阴性组呈现橙色,直观的区分开阴性阳性。琼脂凝胶电泳对扩增的质粒和阳性对照样品的检测呈现出了阳性条带,而对山羊痘、绵羊痘、牛传染性鼻气管炎和牛副流感3型病毒的检测并无阳性条带。灵敏性实验结果表明,LAMP检测ORFV是传统PCR检测ORFV的灵敏性的1000倍。对13份临床样品检测的结果表明,优化的LA MP方法利用电泳法和染色法对ORFV的检出率都为100%,与传统PCR检测结果相一致。上述结果表明优化的LAMP对ORFV的检测具有特异性、高灵敏性且更加方便等优点,从而更适用于现场的高效检测,为后续的工作争取更多的时间。