过表达活化白细胞黏附分子对肝癌HepG2细胞影响的体内外实验研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxunjun
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目的:  通过体内外实验探讨过表达白细胞黏附分子( Activated leukocyte cell adhesion molecule,ALCAM)对人肝癌细胞HepG2生物学作用的影响。  方法:  1.重组腺病毒pSES-Ad-ALCAM感染人肝癌细胞株HepG2细胞中,采用蛋白质印迹法测检测细胞 ALCAM蛋白表达情况。2.CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡变化情况;Transwell检测细胞侵袭和迁移能力。3.将重组腺病毒pSES-Ad-ALCAM以及pSES-ALCAM-siRNA注射入裸鼠瘤体及其周围,检测ALCAM对移植瘤生长以及瘤体中ALCAM蛋白及CD34表达的影响。  结果:  1.蛋白质印迹法检测细胞转染腺病毒后,Ad-ALCAM组较空白对照组ALCAM蛋白表达量增加。2.CCK-8检测发现Ad-ALCAM组中细胞活力增加,FCM测得 Ad-ALCAM组中细胞的凋亡率有下降的趋势,Transwell实验发现 Ad-ALCAM组中细胞的迁移和侵袭能力下降(P值均<0.05)。3.通过在荷瘤裸鼠瘤周以及瘤体中注射腺病毒发现,Ad ALCAM组与空白对照组相比瘤体的生长速度加快、瘤重增加,瘤体组织中表达ALCAM蛋白和CD34数量均增加(P值均<0.05);ALCAM-siRNA组与空白对照组相比瘤体的生长速度减缓、瘤重减轻并且瘤体组织中ALCAM蛋白的表达水平和CD34数量均减少(P值均<0.05)。  结论:  ALCAM过表达可增加肝癌细胞HepG2细胞活力、干扰细胞的凋亡,并对细胞的迁移以及侵袭能力有影响,同时在体内实验中发现ALCAM对瘤体生长有促进作用。
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