论文部分内容阅读
研究背景：年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration, AMD)又叫老年性黄斑变性,在发达国家居所有致盲眼病之首,近年随着我国人口老龄化的加剧,AMD发病率也迅速的上升,逐渐成为国人致盲眼病的焦点,仅上海长宁地区发病率从2003年的17.7%发展至2008年的29.9%,占新发盲眼的21.5%,超越可逆盲的白内障,升为上海致盲首因。为患者及家属乃至社会带来了沉重经济负担,因此将AMD列为眼科防盲研究的重点课题之一。AMD的发病机制尚不清楚,AMD发病机制的研究也一直是眼科领域的热门课题,氧化应激学说、血液动力学说、视杆细胞易感学说研究多年,曾对临床治疗起到一定的指导作用,近年基因遗传学说和炎症免疫学说研究进展迅速,已发现许多AMD相关基因,如补体因子H(com-plement Factor H, CFH)-.补体因子B(CFB)基因、补体2(C2)基因、VEGF基因、LOC387715基因、CX3CR1基因、载脂蛋白E(APOE)基因、ABCA4、ABCI、VLDLR、HEMICENTIN-1基因和LRP6等都与AMD的病理生理有一定的关系。其中CFH已经得到普遍的认同,CFH基因变异是AMD发病关键因素,也被认为是AMD基因研究取得的巨大成功。因此本项目研究证明,以基因多态性为特征的CFH基因变异是AMD的致病关键。因为中医药临床运用广泛,但证候内涵和药物的作用机制的模糊性困扰着AMD中医药的研究步伐,因此有必要借鉴现代医学的新近病机学研究成果,构建AMD的发病机制与中医证候之间的联络桥梁,并以此为切入点进行AMD的中医药治疗研究。研究目的：采用分子生物学的方法,对30例肝肾阴虚型AMD患者及30例正常人进行对照研究,以探讨肝肾阴虚型年龄相关性黄斑变性CFH基因变异与AMD发病的相关性,以进一步探明C等位基因是肝肾阴虚型AMD的致病高风险因素。从而为临床预防年龄相关性黄斑变性的发生发展提供科学依据。研究方法：本项目采用前瞻性试验性研究,选择2012年1月-2014年3月期间于广东省中医院眼科门诊及住院部就诊的通过AMD常规检查和临床安全性筛查,符合纳入标准的肝肾阴虚型AMD患者30例,干性24例,湿性6例,男性10例,女性20例,正常人30例,其中男性12例,女性18例,采集AMD患者及正常人外周血,提取DNA,PCR扩增后测序,检测CFH基因多态性,采用SPSS18.0统计软件进行分析,CFH基因多态性分析为计数资料,基因型之间比较采用χ2检验,以P<0.05为具有统计学意义,探讨肝肾阴虚型AMD患者CFH基因变异特征,进一步探明C等位基因是肝肾阴虚型AMD的致病高风险因素。研究结果：1.30例肝肾阴虚型AMD中,有3人为TT型,占10%,6人为TC型,占20%,21人为CC型,占70%,30例正常人中有19人为TT型,占63.3%,8人为TC型,占26.7%,3人为CC型,占10%,经统计分析,AMD患者与正常人CFH基因多态性的基因型频率有显著性差异(χ2=25.42,P=0.00<0.05)。2.等位基因C在AMD患者中占80%,在正常人中占20%,等位基因T在AMD患者中占76.7%,在正常人中占23.3%,AMD患者与正常人T/C频率分布有显著性差异(χ2=38.58,P=0.00<0.05)。3.肝肾阴虚型AMD患者与正常人年龄符合正态分布,通过t检验得出,年龄之间AMD患者与正常人之间无统计学意义(t=0.06,P=0.95),通过采用χ2检验得出,性别之间无统计学意义(χ2=0.29,P>0.05)。研究结论：肝肾阴虚型AMD与CFH基因多态性Y402H中TC/CC基因型及等位基因C相关,CFH基因型在肝肾阴虚型AMD患者群中呈现规律性分布,CFH突变纯合子CC或／和突变杂合子TC是肝肾阴虚型AMD的主要基因型。C等位基因是肝肾阴虚型AMD的致病高风险因素。