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目的:
研究普罗布考对高糖及LPS作用下大鼠腹膜间皮细胞IL-18、IL-6、CTGF和氧化应激产物丙二醛(MDA)表达的影响
方法:
1、实验动物：清洁级SD雄性大鼠，体重120-160克，由中国医科大学实验动物中心提供。
2、胰蛋白酶消化法分离培养RPMCs，real time-PCR法检测IL-18-mRNA的表达，硫代巴比妥酸法检测MDA的表达。ELISA检测上清液IL-18、IL-6及CTGF的表达。
3、实验分组
(1)正常对照组：只加1％胎牛血清的DMEM/F12培养基；
(2)脂多糖作用不同浓度组：不同浓度的脂多糖(0，1，10，100μg/ml)分别作用6h;
(3)脂多糖作用不同时间组：10μg/ml脂多糖分别作用0，3，6，12，24h;
(4)LPS+普罗布考作用组：（20、40、80μnol/L）普罗布考预孵育1h后，加入10μg/ml脂多糖再作用11h以检测IL-18-mRNA和蛋白及IL-6、CTGF、MDA蛋白的表达。
(5)葡萄糖作用不同浓度组：不同浓度的葡萄糖(1.5％，2.5％，4.25％)分别作用6h；
(6)葡萄糖作用不同浓度组：2.5％葡萄糖分别作用0，3，6，12，24h;
(7)葡萄糖+普罗布考作用组：(20、40、80μmol/L)普罗布考预孵育1h后，加入2.5％葡萄糖再作用11h以检测IL-18-mRNA和蛋白及IL-6、CTGF、MDA蛋白的表达。
结果:
1、LPS对RPMCs的IL-18表达的影响：LPS环境下能显著上调RPMCsIL-18mRNA和蛋白表达，与对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)，且随LPS刺激浓度的增加以及时间的延长，IL-18的表达增加，12h达高峰；
2、LPS对RPMCs的IL-6、CTGF表达的影响：LPS刺激RPMCs IL-6、CTGF蛋白表达显著高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，高浓度组更为明显，且12h达高峰
3、LPS对RPMCs的MDA表达的影响：LPS作用于RPMC MDA显著高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，且随LPS浓度及时间的增加，MDA表达量增加
4、普罗布考对LPS刺激下的IL-18、IL-6、CTGF、MDA表达的影响：普罗布考可抑制IL-18、CTGF以及MDA的表达，与10％LPS组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）随普罗布考浓度增加，抑制作用越强。
5、高糖对RPMCs的IL-18表达的影响：高糖环境下能显著上调RPMCsIL-18mRNA和蛋白表达，与对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)，且随高糖刺激浓度的增加以及时间的延长，IL-18的表达增加，12h达高峰；
6、高糖对RPMCs的IL-6、CTGF表达的影响：高糖刺激RPMCs IL-6、CTGF蛋白表达显著高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，高浓度组更为明显，且12h达高峰
7、高糖对RPMCs的MDA表达的影响：高糖作用于RPMC MDA显著高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），且随高糖浓度及时间的增加，MDA表达量增加
8、普罗布考对高糖刺激下的IL-18、IL-6、CTGF、MDA表达的影响：普罗布考可抑制IL-18、CTGF以及MDA的表达，与2.5％葡萄糖组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）随普罗布考浓度增加，抑制作用越强。
结论:
1、RPMCs存在IL-18的表达。
2、LPS和高糖可以从基因和蛋白水平以浓度和时间依赖方式上调体外培养的RPMCs的IL-18表达，同时以浓度和时间依赖方式刺激IL-6、CTGF、MDA的表达。
3、普罗布考可以从基因和蛋白水平拮抗LPS及高糖对IL-18的表达上调作用，同时抑制IL-6、CTGF、MDA的产生。