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目的:本实验旨在应用实时荧光定量PCR技术筛选并验证可用于诊断、预测脓毒症预后的血清miRNA,并观察血清miRNA在疾病发生发展过程中的动态变化及与疾病的关系。方法:以2011年9月10日至2012年12月30日期间在中国人民解放军总医院呼吸重症监护病房、急诊重症监护病房和外科重症监护病房的住院患者为研究对象,收集满足脓毒症两项或两项以上条件感染患者的血标本,共66例。按照28天疾病转归情况,分为生存患者33例,死亡患者33例,并以24名健康人血清作为对照。采集第1、3、5、7、10、14天的血清样本,并记录对应时间的生命体征、CRP、PCT、血常规、血生化、凝血功能及动脉血气分析结果。利用qRT-PCR验证前期测序筛选出的差异表达miRNA分子,对有差异表达的miRNA进行ROC曲线分析,比较曲线下面积。最后将上述筛选出的miRNA和常用指标包括基础疾病、WBC、CRP、APECHEⅡ评分和SOFA评分均纳入二分类变量logistic回归分析,筛选同脓毒症预后相关的因素。对最终筛选的miRNAs进行靶基因预测,探讨其参与脓毒症发病的机制。结果:选取同脓毒症相关的7种miRNA(miR-16,miR-122,miR-146a,miR-150,miR-193b*,miR-483-5p和miR-574-5p)进行qRT-PCR验证。验证后本研究的主要结果如下:1)66例脓毒症患者与24例健康对照组在各个观测时间点的组间比较,miR-483-5p和miR-574-5p差异无统计学意义(p>0.05), miR-16、miR-122、miR-146a、miR-150和miR-193b*的表达差异有统计学意义(p<0.001);2)66例脓毒症患者中的33例生存组和33例死亡组比较, miR-193b*、miR-574-5p在各时间点上p值均小于0.001,miR-16在第1天(p=0.041)、miR-122在第1天(p=0.026)和第10天(p=0.040),miR-483-5p在第1天(p=0.009)、第5天(p=0.014)第14天(p=0.042)差异有统计学意义,其余miRNAs在各时间点的组间比较差异无统计学意义(p>0.05);3)ROC曲线分析得到miR-146a在各个观测时间点诊断脓毒症的AUC最大(AUC>90%),敏感性和特异性都较高;4)将生存组和死亡组存在差异表达的4种miRNA入组第1天的表达量水平同对应时间点的SOFA评分、APACHEⅡ评分、WBC和CRP做预测病死率的ROC受试曲线,结果显示,miR-193b*的AUC最大为0.858(0.763,0.952),其次是miR-574-5p和miR-483-5p,其AUC分别是0.711(0.573,0.850)和0.681(0.545,0.817);5)利用二分类变量logistic回归分析评价脓毒症的危险因子与保护因子,结果显示年龄、SOFA评分,miR-122、miR-193b*、miR-483-5p和miR-574-5p在评估脓毒症预后方面有重要的价值(p<0.05),但只有miR-193b*进入最后的回归方程,OR是0.769(95%CI,0.667-0.887),提示miR-193b*是脓毒症预后独立的危险因子;6)利用miRanda和targetscan这两个靶基因数据库对miR-193b*进行靶基因预测,共预测得到18个在两个数据库中有交集的靶基因,并通过KEGG数据库对靶基因进行通路注释,其中7个靶基因可能作用于脓毒症的相关通路,为下一步的研究建立了良好的基础。结论:1.证实了miR-16、miR-122、miR-146a、miR-150在脓毒症病程中表达稳定,可作为诊断脓毒症的生物标记物,其中miR-146a的诊断效果最好;2.MiR-193b*是一种可用于脓毒症诊断的生物标记物,并可以用来评价脓毒症的预后,是脓毒症的独立危险因子;3.经预测,miR-193b*可调控18个靶基因,其中7个靶基因可能作用于脓毒症的相关通路。