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目的检测视网膜母细胞瘤(RB)中PTEN基因和p53基因的蛋白表达水平以探讨两者之间的作用和相关性,并分析PTEN基因突变高发区第5外显子和第8外显子(exon5、8)在视网膜母细胞瘤中的突变情况及其与RB生物学行为的关系。方法①采用免疫组化PV-9000二步法检测40例视网膜母细胞瘤及16例正常视网膜组织中PTEN和p53基因的蛋白表达情况,并分析其与RB临床病理特征的关系。②应用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)和DNA测序方法分析35例视网膜母细胞瘤组织及16例正常视网膜组织中PTEN基因第5、8外显子的突变和缺失情况,并结合临床病理特征进行分析。结果①PTEN蛋白在正常视网膜组织中的阳性表达率为100%,显著高于视网膜母细胞瘤组织的55%(P＜0.01);PTEN蛋白的阳性表达率与临床分期、组织病理学分型以及是否伴有视神经浸润有关(P＜0.05);与性别差异无关(P＞0.05)。②p53蛋白在正常视网膜组织中无表达,在视网膜母细胞瘤组织中阳性表达率为57.5%,两者相比差异有统计学意义(P＜0.05);p53蛋白的阳性表达率与临床分期、组织病理学分型以及是否伴有视神经浸润有关(P＜0.05);与性别差异无关(P＞0.05)。③PTEN和p53基因在视网膜母细胞瘤中的蛋白表达呈负相关(r=-0.3710,P＜0.05)。④35例视网膜母细胞瘤组织中PTEN基因总突变率为14.29%,与正常视网膜组的0%相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。⑤RB中,PTEN基因突变率与临床分期、组织病理学分型和是否伴有视神经浸润无关,但在临床分期较早、分化型、不伴视神经浸润的病例的PTEN基因突变率高于临床分期较晚、未分化型和伴视神经浸润者。结论①PTEN基因和p53基因在RB的发生和发展过程中起到协同作用,共同促进RB的恶性进展过程。②视网膜母细胞瘤中PTEN基因的蛋白表达率显著高于PTEN基因第5、8外显子的突变频率,说明基因突变并不是视网膜母细胞瘤中PTEN蛋白表达缺失的唯一原因。③PTEN基因突变与RB的组织病理分型、临床分期及是否伴有视神经浸润无关,但有随着分化程度减低、临床分期增高,突变率降低的趋势,提示PTEN基因突变常发生在生物学行为较好的病例,有助于早期诊断视网膜母细胞瘤,为临床的早期诊断、治疗干预提供参考价值。