肺癌单克隆抗体的制备和放射免疫显像的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongqinshuling
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用人大细胞肺癌细胞(PLA-801)免疫Balb/C小鼠,取免疫后的脾细胞与Sp2/0细胞融合,筛查杂交瘤细胞,制备出抗肺癌单克隆抗体(MCAb)2E3和6D1;2E3为IgG1,相应的抗原分子量67Kd;6D1为IBG2a,抗原分子量30Kd。免疫细胞化学染色测定两种MCAb与大细胞肺癌,肺腺癌和肺鳞癌三种细胞能发生较强的结合反应,而非肺癌细胞仅呈较弱或阴性反应;免疫组织化学的结果基本相同,4例受检的肺癌标本都呈阳性结合反应,乳腺癌和结肠癌与两种MCAb有部分交叉反应,肝癌和胃癌没有反应。 MCAb纯化后用Ⅰ-125标记,标记率达5474%,比放射性为610μCi/μg。经Scatchard作图法测得MCAb 2E3和6D1的亲和常数分别为1.95×109M-1和2.18×109M-1;Lindmo方法测定标记抗体的免疫活性分数,2E3为0.52,6D1为0.49。标记抗体与两种肺癌细胞的结合率达2436%,与非肺癌细胞的结合率小于5.0%。 Ⅰ-125-MCAb注入载人肺癌移植癌裸鼠体内,第3天肿瘤浓聚的放射性量为5.09%,高于其它正常组织,以后逐渐增加,给药后第5天达7.57%。给药后3~5天各组织和器官的T/NT比值为2~10,其中瘤/肺比值在4.0左右。用Ⅰ-131-MCAb和Ⅰ-125-鼠IgG同时注入载瘤裸鼠体内,测定抗体定位指数,给药后3~5天,肿瘤定位指数在3.5~5.6之间,而受检的内脏器官和肌肉的平均定位指数低于1.5。药代动力学资料表明,Ⅰ-125-MCAb在裁瘤裸鼠体内的分布较窄,表观分布容积为636ml/kg,相当于19ml/只裸鼠;标记抗体在体内每天脱碘率达18.6%。血中游离碘绝大部分由尿中排出;半减期(T1/2)为3.4天。 Ⅰ-131-MCAb 2E3和6D1注入载瘤裸鼠体内,不同时间行γ照像,给药后3天,移植瘤都能显像,以后随全身放射性本底下降,肿瘤显示更为清晰。Ⅰ-131-鼠IgG注射后,肿瘤完全不显影。 将Ⅰ-131-2E3和Ⅰ-131-6D1联合应用于临床肺癌放射免疫显像。用彩色扫描技术对7例肺癌病人进行检查,6例获得阳性结果,阳性显像率85.7%。4例病人显像前有病理诊断结果。其中1例鳞癌呈阳性显像,3例小细胞肺癌有2例阳性;显像前未作病理学检查的3例病人都是阳性显像,其中一例显像后支气管镜活检证实为小细胞未分化型癌。非肺癌的对照病人扫描星阴性结果。对3例扫描阳性的患者进行了γ照像和双核素减影,去除血液中非特异放射性后,肿瘤显示更为突出。 以上结果表明:(1)MCAb 2E3和6D1对肺癌表现出相对高的特异性;(2)抗体用放射
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