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目的探讨α-AR阻滞剂和β-AR阻滞剂对ET-1介导的HSCs收缩的影响,为β-AR阻滞剂联用α-AR阻滞剂降低肝硬化门脉高压提供新的理论依据。方法1体外培养HSCs,Western blot检测HSCs AR蛋白的表达;免疫细胞化学法检测肾上腺素受体亚型在HSCs的分布与定位。2应用激光共聚焦显微镜(laser confocal scanning microscope,LSCM),采用第三代钙荧光探针Fluo-3/AM观察α-AR阻滞剂(酚妥拉明)、非选择性β-AR阻滞剂(普萘洛尔)、β1-AR阻滞剂(美托洛尔)及β2-AR阻滞剂(ICI-118551)对正常HSCs以及ET(1.1×10-9 mol·L-1)介导下的HSCs[Ca2+]i荧光强度、细胞面积及最大长径变化的影响。3计量资料数据均以均数±标准差( x±S)表示,用SPSS13.0软件进行统计分析,以P﹤0.05作为差异显著性标准。结果1 Western blot证实HSCs表达α-AR、β1-AR、β2-AR分别在大约57 kD、50 kD、47 kD位置出现α-AR、β1-AR、β2-AR特异性条带。2免疫细胞化学法证实HSCs可以表达α-AR、β1-AR、β2-AR,且α-AR、β1- AR、β2-AR在HSCs中的分布基本一致,主要分布于细胞浆,细胞膜也有少量表达。3除β1-AR阻滞剂美托洛尔外,其余各AR阻滞剂能够导致HSCs[Ca2+]i显著下降(P<0.05);但各AR阻滞剂对HSCs收缩无显著影响。4 ET-1能够引发的HSCs[Ca2+]i瞬间而短暂的升高,且出现HSCs面积及最大直径显著减小,EC50值约在1.1×10-9mol?L-1。5除β1-AR阻滞剂美托洛尔外,其余各AR阻滞剂能够显著抑制ET-1引起的HSC内Ca2+浓度升高及收缩作用(P<0.05),其中β2-AR阻滞剂(ICI11-8551)组和α+β-AR阻滞剂(酚妥拉明+普萘洛尔)阻滞剂组作用最显著。结论1 HSCs可以表达α-AR、β1-AR和β2-AR肾上腺素受体蛋白主要分布于HSCs的细胞浆,细胞膜也有少量表达。2普萘洛尔、酚妥拉明、ICI-118551不仅能够引起HSC [Ca2+]i下降,还能够抑制ET-1介导的HSCs收缩,以ICI-118551及酚妥拉明+普萘洛尔联用时用更强。3β1-AR阻滞剂美托洛尔既不能够引起HSC [Ca2+]i下降,也不能够抑制ET- 1介导的HSCs收缩。