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目的: 术后肠麻痹与机械性肠梗阻不同,是在腹部大手术后早期一过性的胃肠道蠕动功能减退,主要表现为恶心呕吐、腹痛、腹胀、不能耐受食物以及肛门排便排气的减少。术后肠麻痹是影响病患术后恢复和住院时间长短的一个重要因素,同时也给卫生医疗系统带来了巨大的负担。每年用于术后肠麻痹的费用在美国就达到了14.7亿美元。虽然许多措施都用于防治或减轻术后肠麻痹,包括腹腔镜微创手术,快速康复等,但是没有一个能十分有效的缩短术后肠麻痹的期限。目前的动物实验都只强调了对肠道的操作,而忽略了其他的创伤因素,比如缺血再灌注,长时间的手术中腹腔暴露。所以,从临床的角度出发,这些动物模型不能很好的模拟不同的手术创伤因素对动物的肠道的病理生理影响机制。另外,一系列实验表明,动物模型的数据及结论还不能过渡到人类身上。同时,术后肠麻痹不仅仅能由肠道操作引起,也可以因为肠道的缺血再灌注和长时间的腹腔暴露引起。不同的手术创伤的病理生理机制有所不同,也很值得研究。因此本研究的目的在于用三种不同的方法考察炎症及氧化应激对大鼠肠道肌层和胃肠道排空的影响。 方法: 1.实验动物SPF级SD雄性大鼠,体重230±10g,购自上海斯莱克实验动物有限公司。 2.方法及检测指标将成年雄性SD大鼠称重编号随机分为对照组(CTL组),ch肠道操作组(IM组),缺血再灌注组(IR组),腹腔暴露组(AE组)。术后24小时取大鼠肠管,通过肠道几何中心(GC)就是不可吸收的荧光右旋糖酐在肠道的分布来检测术后胃肠道蠕动功能,通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测炎症细胞因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)和氧化应激因子血红素氧合酶同工酶-1(HO-1)及一氧化氮合成酶(iNOS)的mRNA表达;比色法检测丙二醛(MDA)以及谷胱甘肽(GSH)的表达;免疫组化检测肠道肌层髓过氧化物酶(MPO)及细胞间粘附分子-1(LFA-1)细胞的浸润程度。 结果: 1.肠道操作组和腹腔暴露组的GC值没有太大的区别(P=1)。然而,缺血再灌注组的GC值要明显高于肠道操作组和腹腔暴露组(P<0.01)。 2.与对照组相比,肠道操作组(P<0.01),腹腔暴露组(P<0.05)和缺血再灌注组(P<0.01)的MPO阳性细胞明显较高。这些实验组里,肠道操作组的肌层的MPO阳性中性粒细胞数量最多(29.25±5.56),缺血再灌注组中等(18.75±4.11),腹腔暴露组最少(10.25±2.22)。 3.与对照组相比,肠道操作组(P<0.01),腹腔暴露组(P<0.05)和缺血再灌注组(P<0.01)肠道肌层的LFA-1阳性细胞的数量明显增加。而这些组里的LFA-1的增长趋势与MPO阳性的细胞增长趋势相同(肠道操作组,31.25±6.18;缺血再灌注组,20.25±4.57;腹腔暴露组,8.75±1.26)。 4.与对照组相比,肠道操作组(P<0.01)和缺血再灌注组(P<0.01)的炎症因子明显较高,腹腔暴露组(P=1)炎症因子未明显升高。各个对照组中,白介素-1β,白介素-6,肿瘤坏死因子-α,白介素-10的表达在肠道操作组最高,腹腔暴露组最低。 5.与对照组相比,HO-1和iNOS的表达在肠道操作组(P<0.01),缺血再灌注组(P<0.01)和腹腔暴露组(P<0.01)里明显增高。然而,在各个实验组里,HO-1的mRNA的表达没有明显的区别。而iNOS的mRNA在肠道操作组和缺血再灌注组两组之间没有明显差别,但比腹腔暴露组都高(分别为P<0.05和P<0.01)。 6.在所有的实验组里,腹腔暴露组的GSH水平最低(6.84±0.82μmol/g protein),肠道操作组中等(9.12±1.38μmol/g protein),缺血再灌注组最高(12.51±1.56μmol/g protein)。在各个实验组里,MDA在腹腔暴露组里最高(0.33±0.02nmol/mg protein),在肠道操作组里中等(0.28±0.04 nmol/mg protein),在缺血再灌注组里最少(0.23±0.03 nmol/mg protein)。 结论: 大鼠的胃肠道的动力障碍可以由腹腔暴露,肠道缺血再灌注,和肠道操作引起。胃肠道的动力障碍的程度在肠道操作组和腹腔暴露组里类似,而在缺血再灌注组里要明显轻一些。在肠道操作组里,炎症反应时引起胃肠道动力障碍的主要病理生理因素。在腹腔暴露组里,氧化应激才是引起胃肠道动力障碍的主要病理生理因素。在缺血再灌注组,炎症反应和氧化应激有着同等重要的作用。因此,氧化应激如炎症反应一般也是术后肠麻痹发生的病理生理过程中的一个重要因素。