【摘 要】
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目的:本文第一部分以游离表面活性剂单体十二烷基硫酸根离子作为毛细管电泳的背景电解质添加剂,旨在建立一种简单、快速、有效的同时分离测定千金子素L1,千金子素L2和千金子素L3的毛细管电泳法,为千金子药材及相关制剂中三种二萜类化合物的分离分析提供方法依据。本文第二部分以环糊精衍生物作为背景电解质添加剂,旨在建立一种简单、快速、有效的同时分离测定千金子中六种酚酸的毛细管电泳法,并将此方法应用于千金子药材
【基金项目】
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山西省卫生健康委医学重点科技项目（编号:2020XM12）； 山西省留学回国人员科技活动择优资助项目（编号:20210013）；
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目的:本文第一部分以游离表面活性剂单体十二烷基硫酸根离子作为毛细管电泳的背景电解质添加剂,旨在建立一种简单、快速、有效的同时分离测定千金子素L1,千金子素L2和千金子素L3的毛细管电泳法,为千金子药材及相关制剂中三种二萜类化合物的分离分析提供方法依据。本文第二部分以环糊精衍生物作为背景电解质添加剂,旨在建立一种简单、快速、有效的同时分离测定千金子中六种酚酸的毛细管电泳法,并将此方法应用于千金子药材中酚酸化合物的分离测定。本文第三部分采用压力辅助毛细管电泳法测定千金子中六种酚酸的pKa值,为毛细管电泳法测定其他酚酸类化合物的pKa值提供参考依据。方法:1、采用配备二极管阵列检测器的P/ACE MDQ毛细管电泳仪,有效长度为30 cm的未涂层石英毛细管柱（40.2 cm×75μm内径）。在进样压力0.3 psi,进样时间3 s条件下,通过考察溶剂类型及含量、缓冲溶液的类型及浓度、表面活性剂的类型及浓度、检测波长、运行电压、运行温度等对三种千金子素分离的影响,得到分离测定千金子素L1、L2、L3的最佳毛细管电泳条件为:以60%（v/v）甲醇为溶剂,5.0mmol/L醋酸铵（p H=6.86）为缓冲溶液,30 mmol/L十二烷基硫酸钠为添加剂,检测波长280 nm,运行电压25 k V,运行温度25℃。2、采用配备二极管阵列检测器的P/ACE MDQ毛细管电泳仪,有效长度为30 cm的未涂层石英毛细管柱（40.2 cm×75μm内径）。在进样压力0.5 psi,进样时间5 s条件下,考察检测波长、缓冲溶液的类型和浓度、环糊精的类型和浓度、运行电压和运行温度、有机改性剂的含量等对千金子中六种酚酸分离的影响。得到分离测定千金子中六种酚酸的最佳毛细管电泳条件为:5%（v/v）的甲醇,35 mmol/L硼砂缓冲溶液（p H=9.18）,含3 mmol/L 2,6-二甲基-β-环糊精,检测波长为260 nm,运行电压12.5 k V,运行温度25℃。3、采用配备二极管阵列检测器的P/ACE MDQ毛细管电泳仪,有效长度为30 cm未涂层石英毛细管柱（40.2 cm×75μm内径）;考察进样压力对pKa值测定的影响。得到测定pKa值的最佳进样压力为0.1 psi。结果:1、在最佳的电泳条件下,千金子素L1、L2和L3可以在15 min内实现基线分离;各分析物的线性相关系数在0.9945～0.9995之间;日内精密度为1.3%～2.1%,日间精密度为2.7%～3.1%;实际样品中各分析物的平均回收率为98.5%～103.8%。2、在最佳的电泳条件下,千金子中的六种酚酸可以在15 min内实现基线分离,各分析物的线性相关系数在0.9925～0.9990之间;日内精密度为2.1%～2.6%,日间精密度为1.0%～2.1%;实际样品中各分析物的平均回收率为98.8%～104.9%。3、测得六种酚酸的pKa值分别为绿原酸（3.96）、阿魏酸（4.57）、香草酸（4.56）、对香豆酸（4.65）、咖啡酸（4.63）、没食子酸（4.40）。结论:本文建立了一种疏水相互作用电动色谱法,用于千金子及其制剂中结构相似的二萜类化合物千金子素L1、L2、L3的分离测定。建立的疏水相互作用电动色谱法操作简便、快速、有效,为使用毛细管电泳技术分离疏水性二萜类化合物提供了方法依据。建立了一种以环糊精衍生物为选择性试剂的毛细管区带电泳法,对千金子药材中六种酚酸化合物进行分析测定。该方法操作简单、快速,为千金子药材质量控制及全面开发提供了一种可供选择的方法。采用压力辅助毛细管电泳法成功测定了六种酚酸的pKa值,为使用毛细管电泳技术测定其他酚酸类化合物pKa值提供了参考。
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