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尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nicotinamide Phosphoribosyltransferase, Nampt),是哺乳动物体内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)生物合成的限速酶,通过合成NAD广泛参与调节细胞内重要生理病理过程。近年来研究发现,Nampt与肿瘤的关系密切,Nampt已经成为一些肿瘤药物治疗的新靶点,体内外研究表明其特异性抑制剂FK866(AP0866)具有明显抗肿瘤活性,可诱导肿瘤细胞凋亡及自吞噬,并已作为抗部分实体瘤的新药进入临床Ⅱ期试验。星形细胞胶质瘤是最常见的脑肿瘤,恶性度高,对传统抗肿瘤药物均不敏感。研究发现正常星形胶质细胞不表达Nampt,但在星形细胞胶质瘤细胞出现大量诱导表达,且其表达与肿瘤的恶性程度正相关。为研究Nampt是否可以作为抗星形细胞胶质瘤的新靶点,FK866是否有抗星形细胞胶质瘤的作用,我们采用大鼠星形细胞胶质瘤C6细胞株,观察FK866对细胞活性、细胞凋亡及自吞噬、细胞周期和细胞增殖的影响；并初步研究FK866抗肿瘤活性与MARK通路和p53之间的关系。结果发现：(1)MTT试验发现FK866时间和浓度依赖性地抑制C6细胞活性,其抑制作用能够被Nampt的直接代谢产物NMN(0.01-1 mM)逆转。FK866对C6细胞活性的抑制作用需48-72 h,作用72 h后的最大抑制率达86.3％,IC50约为10 nM(-8.07logM),远远低于临床胶质瘤治疗药物顺铂(-5.83 logM)和替莫唑胺(-2.82 logM)；FK866还能够浓度依赖性的抑制三种人星形细胞胶质瘤细胞株SHG44、U251和BT325的活性,IC50与C6细胞的IC50接近,Western blot发现这些细胞均有Nampt的表达；而原代培养大鼠星形胶质细胞也有Nampt的表达,其细胞活性同样能够被FK866抑制,但免疫荧光染色发现在小鼠脑内正常星形胶质细胞并无Nampt表达。(2)流式细胞检测发现FK866 100 nM可引起部分细胞凋亡,而10和100 nM均可引起细胞内出现LC3阳性颗粒,显示细胞发生自吞噬,但自吞噬抑制剂3MA和LY294002对FK866引起的细胞活性下降无明显抑制作用,说明细胞活性的显著下降与自吞噬无明显关系。(3)MTT试验和细胞计数均发现FK866作用48 h后能够浓度依赖性的抑制C6细胞增殖,其IC50约为40 nM,1 mM NMN可抑制FK866的作用；流式细胞检测细胞周期发现,40 nM FK866作用48 h可使G2期细胞百分率由8.78％上升到21.25％(P<0.001),G1期细胞的百分率由61.93％下降到48.78％(P<0.001),S期的百分率无明显变化,显示FK866诱导C6细胞发生G2／M阻滞,该作用同样能够被1 mM NMN逆转。(4) Western blot发现C6细胞在生长过程中,有明显ERK1/2激活,而FK86640 nM作用48 h能够显著抑制ERK1／2磷酸化,但对JNK和p38无明显影响；ERK1／2抑制剂U0126可浓度依赖性抑制C6细胞的活性,与FK866合用时的抑制效应与单独应用时的作用相近,提示两者对细胞活性的抑制作用是通过共同的通路。U0126 20μM对C6细胞的细胞周期无影响,而U0126 40μM可使G1期细胞增加,S期细胞减少,产生G1／S阻滞,提示FK866诱导的G2／M阻滞与ERK抑制无关。p53抑制剂PFT对FK866诱导的G2／M阻滞无影响。我们的研究显示,FK866通过抑制Nampt酶活性→减少NAD的合成→抑制ERK激活→抑制细胞增殖→抑制细胞活性；另外,可诱导部分细胞发生自吞噬,高浓度时可诱导细胞凋亡,同时可引起p53和ERK非依赖的细胞周期G2／M阻滞,其中FK866对肿瘤细胞细胞周期和细胞增殖的调控是我们首次发现。结果表明Nampt是星形细胞胶质瘤的一个药物治疗新靶点,其抑制剂FK866可能是一个高效的抗胶质瘤新型药物,然而FK866在星形细胞胶质瘤中的作用方式和机制可能有一定的特异性,需要进一步研究。