中药白屈菜中生物碱的分离纯化制备与表征

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中药化学成分是一种非常复杂的物质体系,特别是生物碱类的化合物。生物碱的复杂性和多样性使其分离纯化工作变得异常艰巨,一直以来都是中药物质基础研究的一大难题。本论文针对生物碱类化合物分离纯化的难点,以中药白屈菜为研究对象,运用高效液相色谱法,分别从生物碱类化合物的分离纯化制备和表征两个方面展开研究。针对生物碱类化合物分离纯化的难点,构建了白屈菜中生物碱类化合物的二维离线反相色谱分离方法,将发展得到的二维分离体系应用于白屈菜中生物碱类化合物的分离分析中。通过试验条件的优化和线性放大实现了白屈菜中生物碱类化合物的大规模制备。然后利用质谱和核磁等表征手段对白屈菜中分离得到的生物碱类化合物进行结构鉴定。结果从白屈菜生物总碱提取物中共分离得到11个生物碱类化合物,其中N-甲基金罂粟碱((S)-N-Methylstylopine)和降氧化北美黄连次碱(Noroxyhydrastinine)为白屈菜中首次分离。实验表明,构建的二维离线反相色谱分离体系实现了对白屈菜中生物碱类化合物的高效分离纯化制备。针对核磁共振等传统化合物鉴定方法时间长、工作量大等问题,研究了基于HPLC-Q-TOF/MS的白屈菜生物碱化学成分快速鉴定方法。通过分析白屈菜中不同种类生物碱的质谱数据,归纳生物碱的质谱裂解规律,结合相关文献,对白屈菜中生物碱类化合物进行了系统的结构鉴定,并用对照品进行了验证。结果从白屈菜生物总碱提取物中共鉴定得到21个生物碱化合物,其中N-甲基金罂粟碱((S)-N-Methylstylopine)为白屈菜中首次报道,二氢黄连碱(Dihydrocoptisine)和去甲基白屈菜碱(Norchelidonine)为白屈菜中首次用该技术鉴定。该方法具有快速、准确、高效等特点,对天然产物复杂体系中成分的初步定性研究,以及对生物碱分离纯化工作具有重要意义。本论文建立了一种二维离线反相液相色谱制备生物碱的方法,实现了白屈菜中生物碱类化合物的高效分离,并利用液质联用法(LC-MS)对白屈菜中的生物碱类化合物进行结构鉴定。对认识中药物质基础,提升中药分离纯化水平具有一定的促进作用。
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