【摘 要】
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该论文工作,首先在人ACAT-1 cDNA K1对应基因组DNA的染色体定伴等研究中,发现人ACAT-1 cDNA K1序列来源于两条不同的染色体,其外显子Xa和外显子1-16分别与人7号和1号染色体的
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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该论文工作,首先在人ACAT-1 cDNA K1对应基因组DNA的染色体定伴等研究中,发现人ACAT-1 cDNA K1序列来源于两条不同的染色体,其外显子Xa和外显子1-16分别与人7号和1号染色体的相应序列一致.一个体内重要代谢过程的关键酶基因分布于两条不同的染色体上,一定具有特殊的生理和病理意义,同时这一现象在高等真核基因中亦十分罕见.在所建立的完整细胞和无细胞体系中.成功地进行人ACAT-1 cDNA K1对应mRNA的剪接加工,进一步证实mRNA确实是由不同人染色体来源的ACAT-1基因转录产物,通过RNA分子间的反式剪接机制加 工成熟.这一工作的突破,为开拓该特殊RNA反式剪接作用机制及其生物学功能等新的领域 研究提供了重要的前体条件.在开展这一特殊RNA反式剪接的分子机制研究中,已发现人ACAT-1基因的启动子、外显子及extron序列中均含有人ACAT-1 mRNA反式剪接的必需信息,其中外显子Xa的RI(769-811bp)和RIII(918-992bp)区域以及RIb(793-810bp)和RIIIc(962-992bp)区域中分别存在与反式剪接3-外显子选择特异性以及反式剪接产物中外显子Xb形成相关的 结构或序列元件,而外显子Xa下游116-124bp extron序列中存在的Sm位点相似序列则是P7启动子转录产物参与RNA反式剪接所必需的元件.此外,该论文工作还利用荧火素酶报告基因 和细胞转染技术,发现人ACAT-1基因反式剪接产物中存在的长5-UTR结构结其下游 编码序列的翻译具有明显的抑制作用.这为揭示RNA反式剪接人ACAT-1表达调控过程中的生物学功 能,提供了重要的实验证据.
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