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1、研究目的探究丙酮酸激酶基因(Pyruvate kinase,PKM)PKM1和PKM2在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓细胞(非M3)的表达水平,分析PKM2表达情况与AML患者临床病理资料的关系,以及分析PKM2表达量与AML诱导化疗疗效之间的关系,为AML的发病机制研究和临床诊疗提供新的思路。2、研究方法收集70例初治AML(非M3)患者骨髓液,并且每一位患者接受至少两个疗程的连贯性治疗。同时收集同时期年龄性别相匹配的正常组35例。利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术在70例初治AML(非M3)患者及35例正常组的骨髓细胞中检测PKM1和PKM2的表达水平,并分析PKM2与染色体核型、外周血象(白细胞计数、血红蛋白计数及血小板计数)和骨髓细胞中原始细胞数、5个预后基因(double CEBPA、NPM1、DNMT3、FLT3-ITD)以及与诱导化疗疗效之间的关系。3、研究结果(1)利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)实验方法检测PKM1和PKM2在70例初治AML患者及35例正常组中的表达水平,结果显示:与正常组相比,PKM1和PKM2在总的AML患者中的表达量显著上调;PKM1的表达量是正常组的1.30倍,P<0.001,PKM2的表达量是正常组的1.41倍,P<0.001;PKM2/PKM1的比值是正常组的1.16倍,P<0.001。与正常组相比,正常核型AML患者中PKM1和PKM2的表达量同样是显著上调;PKM1是正常组的1.31倍,P<0.001,PKM2是正常组的1.57倍,P<0.001,PKM2/PKM1是正常组的1.23倍,P<0.001。(2)分析PKM2的表达量与AML临床病理参数关系,结果显示:PKM2表达水平与doubleCEBPA突变率呈负相关。(3)分析PKM2表达量与诱导化疗疗效之间的关系,结果显示:PKM2表达量在难治组均高于CR组和正常组,分别P<0.001和P=0.006;CR组与正常组未见明显差异(P=0.989)。分析PKM2、临床特征以及实验室指标在AML患者中难治组和CR组之间的差异,结果显示:只有PKM2高表达在AML难治组和CR组之间具有统计学差异,P=0.010。运用COX回归模型分析AML中PKM2表达量、年龄、白细胞计数、预后基因(doubleCEBPA、NMP1、FLT3-ITD、DNMT3)与诱导化疗之间的相关性,结果显示:PKM2高表达(P=0.044)是AML诱导化疗疗效的独立不良因素。4、研究结论(1)PKM1和PKM2在AML患者中的表达量明显升高,且PKM2/PKM1显著高于正常,提示PKM2可能参与了AML的发病。(2)PKM2的高表达与double CEBPA突变率呈负相关,PKM2在难治性AML患者中表达显著上升,是AML诱导化疗疗效的独立不良因素,结合文献PKM2与多种肿瘤耐药相关,提示PKM2高表达可能是AML预后不良的原因之一,可能跟AML化疗的原发耐药有关。