【摘 要】
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草酸是核盘菌等病原菌分泌的一种致病毒素，相关研究表明，油菜等作物对草酸的抗性与对核盘菌的抗性保持高度一致，故可将草酸用于筛选油菜菌核病的抗病性。前期通过半定量RT-PCR佐证了基因芯片预测的草酸胁迫下，拟南芥基因APX1及TMS1表达上调结果。APX1基因编码的植物抗坏血酸过氧化物酶（APX）主要存在于叶绿体与胞质中，以抗坏血酸（AsA）作为主要电子供体清除植物细胞中的H2O2，达到保护细胞的目的
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草酸是核盘菌等病原菌分泌的一种致病毒素，相关研究表明，油菜等作物对草酸的抗性与对核盘菌的抗性保持高度一致，故可将草酸用于筛选油菜菌核病的抗病性。前期通过半定量RT-PCR佐证了基因芯片预测的草酸胁迫下，拟南芥基因APX1及TMS1表达上调结果。APX1基因编码的植物抗坏血酸过氧化物酶（APX）主要存在于叶绿体与胞质中，以抗坏血酸（AsA）作为主要电子供体清除植物细胞中的H2O2，达到保护细胞的目的。已有研究表明APX基因的过表达可以增强对逆境的抗性。TSM1基因编码的DnaJ是具有J结构域的蛋白质大家族成员，大部分J蛋白具有分子伴侣的特性。大量的研究报道表明，J蛋白在植物的生长发育及植物的抗逆反应中具有重要的功能。本研究构建了目的基因APX1及TMS1基因的过表达突变体APX1-OE与TMS1-OE，经转化、筛选验证得到候选纯合体植株，通过Tail-PCR明确插入位点，并结合其对应的纯合体T-DNA失活突变体apx与tms1，用RT-PCR验证了OE过表达而失活突变体不表达。本研究采用拟南芥-菌核病的模型，利用离体与活体接种的方法，并运用DAB与台酚蓝染色，检测细胞过敏反应导致的活性氧化物积累及细胞坏死情况。实验结果显示，这两个基因所对应的过表达突变体植株对菌核病有显著的抗性，APX1-OE在接种逆境下爆发过敏反应，限制了病原菌的进一步扩展。此外，我们测量了在草酸胁迫下突变体的根系生长长度，验证了过表达植株较野生型对草酸有明显抗性，再次验证草酸抗性与核盘菌抗性具有一致性。
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