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饲用微生态制剂是一类新型饲料添加剂,能够维持动物肠道菌群平衡,抑制肠道致病菌的繁殖,在防治腹泻的同时避免了病原菌耐药性的产生,有着抗生素无法比拟的优点。饲用芽孢杆菌制剂是一类新型的微生态制剂,不但具有以上功能,而且具有抗逆性强、耐高温、耐酸碱等优点,在动物肠道中产生蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等多种消化酶,协助机体分解消化营养物质,提高饲料转化率,降低养殖成本。本试验所用鸡源枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)J-4菌株是由本实验室从健康肉鸡肠道中筛选得到的益生菌株,能分泌产生蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶和淀粉酶等多种消化酶,对大肠杆菌等肉鸡肠道常见病原菌有显著抑制作用。为研究枯草芽孢杆菌J-4菌剂对肉鸡生长性能、消化性能及肠道主要微生物菌群的影响,选用4日龄肉仔鸡3000只,随机分成试验组和对照组,对照组饲喂基础日粮,试验组1-18天期间饲喂添加0.1%J-4菌剂(活菌含量1.0×1010cfu/g)的基础日粮,之后停饲J-4菌剂。计算肉鸡日增重、料重比、腹泻率和死亡率,取样测定肉鸡粪便中消化酶活力、有机营养物质含量及各肠道菌群数量。结果显示,与对照组相比,饲料中添加0.1%的J-4菌剂,可使肉鸡的平均日增重提高12.01%,料肉比降低10.72%,腹泻率降低63.74%,死亡率降低32.55%;试验组粪便中α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶及纤维素酶的平均活力比对照组分别提高39.82%、31.56%、44.60%、45.30%;淀粉、粗蛋白、粗脂肪和粗纤维含量分别下降32.09%、39.74%、28.23%、22.62%;试验组肉鸡粪便中大肠杆菌菌群比对照组降低34.32%,乳酸菌、双歧杆菌及芽孢杆菌数量分别比对照组增加33.52%、39.83%和27.93%。停饲J-4菌剂后,试验组粪便中消化酶活力、常规有机营养成分含量及微生物菌群等指标又逐渐接近对照组。另外,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测J-4菌剂对肉鸡肠道菌群的影响。选取1日龄肉仔鸡270只,随机分成对照组、抗生素组和益生菌组,分别饲喂基础日粮、基础日粮+抗生素(丁胺卡那霉素60mg/kg)、基础日粮+0.1%J-4菌剂(活菌含量1.0×1010cfu/g),每组3个重复。在21日和42日龄采集各组粪样,采用实时荧光定量PCR法检测粪便中总菌、乳酸菌、双歧杆菌和大肠杆菌数量。结果表明,肉鸡日粮中添加0.1%J-4菌剂后,粪便中总菌、乳酸杆菌和双歧杆菌数量比对照组和抗生素组有明显提高(P<0.05);大肠杆菌数量与对照组相比有明显下降(P<0.05),但与抗生素组差异不明显(P>0.05)。该结果从分子水平说明J-4菌剂可以增加肠道中总菌数量,促进乳酸菌和双歧杆菌等有益菌的生长,抑制大肠杆菌等有害菌的生长,且抑制效果与丁胺卡那霉素等抗生素相似,可以替代抗生素防治肉鸡腹泻,并且具有抗生素无法比拟的促生长效果。与传统菌落计数法相比,qPCR法特异性高、敏感性强、方便快捷。综上研究表明,J-4菌剂具有防治肉鸡腹泻、降低肉鸡死亡率、提高肉鸡肠道消化酶活力、提高饲料转化率、维持肠道菌群平衡的作用。