【摘 要】
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目的:探讨人体增生性瘢痕来源的成纤维细胞的细胞CD表型及分化潜能,为进一步研究增生性瘢痕形成的机制奠定前期研究基础。方法:采用酶消化法从1年人增生性瘢痕中提取体外分离培
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目的:探讨人体增生性瘢痕来源的成纤维细胞的细胞CD表型及分化潜能,为进一步研究增生性瘢痕形成的机制奠定前期研究基础。方法:采用酶消化法从1年人增生性瘢痕中提取体外分离培养成纤维细胞,采用倒置显微镜观察其细胞形态及生长特点,待细胞培养传代至第3代,采用Vi-CELL细胞计数仪检测细胞生长情况,应用流式细胞仪(FCM)检测成纤维细胞间充质干细胞表型标志CD73、CD44、CD105、CD90、CD34、CD45、CD14的表达情况;通过免疫细胞化学检测该细胞CK19、Oct4、Vementin(波形蛋白)的表达情况及免疫荧光检测α-SMA(a-平滑肌肌动蛋白):本研究同时诱导分化检测该细胞向成骨细胞、成软骨细胞、成脂细胞方向诱导分化能力。结果:从人增生性瘢痕中分离培养成纤维细胞,细胞原代培养第二天开始采用倒置显微镜观察细胞生长情况,培养第二天细胞呈小蝌蚪状体壁生长,逐渐成长梭型,不规则三角形,细胞生长的排列多呈放射状、编织状生长。细胞生长曲线显示细胞1-2天生长较慢,从3-5天左右细胞生长较快,6-7天细胞进入平台期;从细胞流式结果显示细胞表型CD90、CD44、CD105、CD73呈高表达,CD45、CD34、CD14不表达;免疫细胞化学检测间充质细胞标记物Vementin(波形蛋白)、多能干细胞标志物Oct4均呈阳性表达,免疫荧光检测α-SMA(a-平滑肌肌动蛋白)呈阳性表达,上皮细胞标志物CK19呈阴性表达;多向诱导分化实验该细胞可向成骨细胞、成软骨细胞、成脂细胞,具有多向分化潜能。结论:人增生性瘢痕来源成纤细胞具有间充质干细胞样特性,这种间充质干细胞样细胞特性可能在增生性瘢痕的形成和创面修复中发挥至关重要的作用。
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