芦根乙醇提取物对糖尿病小鼠降血糖作用的实验研究

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目的糖尿病(Diabetes, DM)是一种由于遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征,血糖一旦控制不好会引发多种并发症,导致肾、眼、足等部位的衰竭病变,且无法治愈。芦根中含有丰富的多聚糖类化合物,并含有多聚醇、甜菜碱、薏苡素、游离氨基酸、天门冬酰胺等,具有较高的药用价值。本实验通过糖尿病小鼠模型的创建,研究芦根对糖尿病小鼠的降血糖以及其他修复作用。方法①芦根经过乙醇提取、冷却乙醇沉淀、蒸馏水洗脱等步骤得到芦根乙醇提取物;②制备糖尿病小鼠模型,腹腔注射新鲜配置的四氧嘧啶溶液(200mg/kg)。60小时后禁食(不禁水),12小时后,尾静脉取血,血糖仪测空腹血糖值,大于11.1mmol/L为糖尿病模型小鼠;③实验动物分组如下:正常对照组、模型组、芦根乙醇提取物低剂量组、芦根乙醇提取物中剂量组、芦根乙醇提取物高剂量组、药物对照组。实验周期为15天,每日灌胃一次,停药次日动物称体重、测空腹血糖,采用眼眶后静脉丛取血采集标本,剖取小鼠胰腺、肝脏、肾脏;④采用酶动力学法测定血清中糖化血清蛋白(Glycosylated serum protein, GSP)、总胆固醇(Total cholesterol, CHO).低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein, LDLC)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、高密度脂蛋白(High-density ipoprotein, HDLC)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-PX)、总超氧化物歧化酶(Supcroxidc dismutase, SOD)、微量丙二醛(Maleic dialdehyde, MDA).总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)含量。采用ELISA测定血清中胰岛素(Insulin,INS)、胰岛素受体p (Insulin receptor, IR-B)含量;⑤采用免疫组织化学、组织化学法观察胰腺、肝、肾组织的修复。结果1.芦根乙醇提取物高、中剂量组及药物对照组实验后血糖显著低于实验前(P<0.01)。芦根乙醇提取物高、中剂量组及药物对照组GSP含量均显著低于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组与药物对照组GSP含量均无显著差异。2.芦根乙醇提取物高、中、低剂量组及药物对照组CHO含量均显著低于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组与药物对照组CHO含量均无显著差异。芦根乙醇提取物高剂量组及药物对照组TG含量均显著低于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高剂量组与药物对照组TG含量无显著差异。3.芦根乙醇提取物高剂量组及药物对照组HDLC含量均明显高于模型组(P<0.01):芦根乙醇提取物高剂量组与药物对照组HDLC含量无显著差异。芦根乙醇提取物高、中、低剂量组及药物对照组LDLC含量均显著低于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组与药物对照组LDLC含量均无显著差异。4.芦根乙醇提取物高、中、低剂量组及药物对照组GSH-PX含量均明显高于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组与药物对照组GSH-PX含量均无显著差异。芦根乙醇提取物高剂量组及药物对照组SOD含量均显著高于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高剂量组与药物对照组SOD含量无显著差异。芦根乙醇提取物高剂量组及药物对照组MDA含量均明显低于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组与药物对照组MDA含量无显著差异。5.芦根乙醇提取物高、中、低剂量组及药物对照组T-AOC、GSH、CAT含量均明显高于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组及药物对照组T-AOC、GSH、CAT含量均无显著差异。6.芦根乙醇提取物高、中、低剂量组及药物对照组INS、IR-B含量显著高于模型组(P<0.01);芦根乙醇提取物高、中、低剂量组与药物对照组INS含量无显著差异;芦根乙醇提取物高剂量组IR-B含量显著高于药物对照组(P<0.01)。芦根乙醇提取物高剂量组对受损胰岛B细胞具有修复作用。7.芦根乙醇提取物高、中剂量组可促进肝组织对葡萄糖的利用,同时对受损肾脏具有明显的改善作用。结论1.芦根乙醇提取物显著降低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖及GSP含量2.芦根乙醇提取物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠具有良好的调节脂代谢作用。3.芦根乙醇提取物可使四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠有效地发挥抗氧化作用。4.芦根乙醇提取物显著增加四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠INS、IR-B含量;对受损胰岛B细胞具有修复作用,可以更好的促进胰岛发挥其正常功效,降低血糖。5.芦根乙醇提取物能使四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠肝脏增强对葡萄糖的利用,从而降低血糖;同时对受损肾脏具有明显的修复作用。
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