山萸肉是山茱萸科(Cornus officinalis Sieb.et Zucc)植物山茱萸的干燥成熟果肉,是我国传统的名贵中药,广泛应用于临床,具有补益肝肾、涩精固脱的功效。山萸肉主要含有环烯醚萜苷类、糖类、有机酸类等化学成分,其中莫诺苷、马钱苷是山茱萸环烯醚萜苷类的主要组成成分。现代药学研究发现山茱萸环烯醚萜苷类具有多种药理活性,如预防糖尿病肾病、免疫调节、抗炎、抗氧化等,一定程度上解释了其肾脏、神经保护作用。7-O-乙基莫诺苷是山茱萸环烯醚萜苷类中的一种,但是有关7-O-乙基莫诺苷单体的分离、在山萸肉中的含量及其药理活性、药动学和组织分布均未见文献报道。针对以上研究背景和问题,本研究课题以山萸肉为原料,制备7-O-乙基莫诺苷,系统探索7-O-乙基莫诺苷体内外抗炎活性及其在大鼠体内的药动学规律。本学位论文主要由以下四部分组成:第一部分:山萸肉中7-O-乙基莫诺苷的制备从制萸肉中醇提得到粗浸膏,依次经过石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,合并乙酸乙酯和正丁醇层。挥干有机溶剂,萃取物经过硅胶柱层析,以二氯甲烷—甲醇系统依次梯度洗脱,即得山茱萸环烯醚萜苷类。再通过中压快速分离系统和制备高效液相色谱制得7-0-乙基莫诺苷。第二部分:山萸肉中7-0-乙基莫诺苷体内外活性体外抗炎活性采用Elisa法检测了 7-O-乙基莫诺苷对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞受脂多糖(LPS)刺激后分泌的炎症因子TNF-α和IL-6的抑制作用和7-O-乙基莫诺苷对高糖刺激的小鼠肾小球系膜细胞SV40MES13细胞的形态影响。结果表明:7-O-乙基莫诺苷具有显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞产生的促炎症因子TNF-α和IL-6的释放,同时也能明显改善LPS刺激后RAW264.7细胞的形态;并表现出保护高糖诱导的肾小球系膜细胞形态的效果。7-0-乙基莫诺苷的体内抗炎活性采用Balb/c小鼠,小鼠尾静脉注射给以7-0-乙基莫诺苷0.5 h后,腹腔注射LPS刺激4 h,眼眶取血,分离血清,Elisa法测定血清中炎症因子TNF-α和IL-6的水平。结果显示7-O-乙基莫诺苷能明显抑制由LPS刺激产生的炎症因子TNF-α和IL-6的分泌,具有显著的体内抗炎活性。第三部分:山萸肉中7-0-乙基莫诺苷的药动学研究建立大鼠血浆中7-O-乙基莫诺苷的LC-MS/MS测定方法,该方法的专属性、准确性和灵敏度等均符合生物样本测定要求。分别对两组大鼠以灌胃(80 mg/kg)和尾静脉注射(30mg/kg)的方式给予7-0-乙基莫诺苷,不同时间点眼眶取血,样品经过前处理后进行测定分析,研究结果显示7-O-乙基莫诺苷的生物利用度为2.13%±0.75%。第四部分:7-0-乙基莫诺苷的组织分布研究建立大鼠组织中7-0-乙基莫诺苷的LC-MS/MS测定方法。SD大鼠随机分为四组,尾静脉注射7-O-乙基莫诺苷(30 mg/kg),分别在给药后30、60、120、240 min,股动脉放血处死,分别取肝、心、脾、肺、肾、脑、胃组织脏器,样品前处理后进行含量检测。组织分布研究表明7-0-乙基莫诺苷在大鼠各脏器广泛分布,尤其在肝、心、肾等血流灌注丰富的内脏分布较多。该结果与传统中医认为的山茱萸具有补益肝肾的功效相一致。结合体内外的抗炎结果,提示7-O-乙基莫诺苷可能在预防或治疗糖尿病肾病方面有一定的作用。