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本论文从以下九个方面研究了卤虫(Artemia)的生物学特性。
一、西藏卤虫卵最适孵化温度的研究:
研究了温度对西藏卤虫卵孵化率的影响。在18~32℃温度范围内,随孵化温度的升高,西藏卤虫卵的孵化率首先明显升高,由18℃时的36.9%升高到22℃的63.2%,达到最高值。随着孵化温度的继续升高,孵化率呈逐渐下降的趋势。32℃时孵化率降至44.7%,比最高孵化率降低了近20个百分点。以上结果说明,西藏卤虫卵的最适孵化温度为22℃左右,明显低于其它种或品系卤虫卵的最适孵化温度。
二、卤虫卵对高温耐受性的研究:
研究了1998年采自天津塘沽盐场的卤虫卵(含水量10%)对干热和水热的耐受性。结果表明,卤虫卵对干热的抗性较强,在70℃、80℃和90℃的干热环境中处理90min,对卵的孵化率影响很小。随着处理温度的升高,卤虫卵孵化率逐渐下降。130℃处理10min,孵化率从90%下降到9%,而处理30min则降为0。卤虫卵对水热的耐性较差,在50℃的热水里处理60min,其孵化率降为1%,而在90℃的热水中处理20s,则卵的孵化率降为0。
三、冷冻等处理对不同孵化进程的卤虫卵存活率的影响:
研究了冷冻、双氧水和干燥处理对处于不同孵化进程中的卤虫卵的存活率(孵化率)的影响。冷冻对未经孵化处理的卵的孵化率影响很小。冷冻8周后,其孵化率基本保持不变。孵化进行了3h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了10个百分点。孵化进行了6h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了31个百分点。孵化进行了9h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了40个百分点。
处于不同孵化阶段的卤虫卵经冷冻处理8周后,再经3%双氧水处理10min钟和40℃干燥处理6h,其孵化率表现为不同的特点。未经孵化处理的卵的孵化率基本保持不变。孵化进行了3h的卤虫卵,其孵化率再次降低5个百分点。孵化进行了6h的卤虫卵,其孵化率再次降低了20个百分点。孵化进行了9h的卤虫卵,其孵化率再次降低了37个百分点。
四、尕海孤雌生殖卤虫的雌雄嵌合体:
在实验室条件下,培养了一个采自青海尕海湖的孤雌生殖卤虫(ArtemiaparthenogeneticaofGahai)的克隆。该克隆包括3,578个雌体和103个罕见雄体,在这些罕见雄体中发现二例雌雄嵌合体。其外部形态均表现为雄性,即具有正常的执握肢和外交接器,但在其体左侧出现了正常形态特征的卵细胞,表明在这两个外表为雄性的卤虫中有卵巢存在,为雌雄嵌合体。
五、尕海孤雌生殖卤虫罕见雄体前突和刺状突的形态特征:
利用体视显微镜和扫描电子显微镜,研究了中国青海尕海盐湖孤雌生殖卤虫(ArtemiaparthenogeneticaofGahai)罕见雄体执握肢前突和交接器基部刺状突的形态特征。结果表明,尕海孤雌生殖卤虫罕见雄体的前突呈亚圆形,表面分布有刺和机械感受器。雄性交接器基部具有刺状突,刺状突顶端具有鳞片状突起形成的玫瑰花状簇。
六、尕海孤雌生殖卤虫罕见雄体的培养及其与中华卤虫的杂交:
从中国青海尕海盐湖孤雌生殖卤虫(ArtemiaparthenogeneticaofGahai)种群中筛选出一个罕见雄体发生率较高的克隆,罕见雄体的发生率为3.1%。本实验室批量保存了本克隆的休眠卵。
利用该罕见雄体与中华卤虫的雌体进行了杂交实验,产生可育的F1代和可成活的F2代,但杂交后代(特别是F2代)出现杂种破落现象。认为孤雌生殖卤虫与亚洲的两性生殖卤虫(A.urmiana和A.sinica)具有较近的亲缘关系。
七、化学物质对卤虫产卵量和产仔数的影响:
研究了碳酸铵、氯化铵、尿素、氨水和柠檬酸铁对中华卤虫(Artemiasinica)产卵总数和产仔总数的影响。结果表明,氯化铵、尿素和柠檬酸铁对中华卤虫产仔总数没有显著影响,而碳酸铵和氨水对中华卤虫产仔总数具有极显著影响。碳酸铵和氯化铵对中华卤虫产卵总数没有显著影响,但柠檬酸铁、尿素和氨水对中华卤虫产卵总数具有极显著影响,分别比对照提高2.31倍、3.09倍和3.55倍。
对由柠檬酸铁刺激条件下产生的卤虫卵进行了冷冻处理以打破休眠,结果表明,经过7周冷冻处理,该卵的孵化率达到91.6%。说明柠檬酸铁在显著提高卤虫产卵量的同时,对卤虫卵的质量并无不利影响。
八、光周期对尕海孤雌生殖卤虫产卵量的影响:
研究了光周期和光照强度对尕海孤雌生殖卤虫(ArtemiaparthenogeneticaofGahai)产卵量的影响。光周期分别为LD16∶8、LD8∶16、LD4∶20和LD0∶24。光照强度分别为100lx和700lx。结果表明,光周期对卤虫的产卵量具有极显著影响(P<0.01)。所有短光组(8h及以下光照)卤虫的产卵量均与LD16∶8700lx组卤虫的产卵量有极显著差异(P<0.01)。长光组(16h光照)间卤虫的产卵量无显著差异(P>0.05),短光组间卤虫的产卵量亦无显著差异(P>0.05)。光照强度对卤虫产卵量的影响较小。在LD8∶16100lx的光照条件下,卤虫的产卵量最多。
在LD8∶16150lx条件下群体培养的成体卤虫,在36d内平均产卵量为290个。对卤虫卵进行了冷冻处理以打破休眠,经过7周冷冻处理,该卵的孵化率达到90.1%,说明本实验条件下所产卤虫卵的质量正常。
九、光照和水质控制卤虫的产仔方式:
本文采用尕海孤雌生殖卤虫(ArtemiaparthenogeneticaofGahai)的一个克隆,调控光照和水质等因素,实现了卤虫产仔方式的全人工控制。
卤虫卵胎生的控制条件为:盐度:80g/l;光照周期LD16∶8,光照强度约700lx;温度:25±1℃;不充气。培养液中添加EDTA钠铁,终浓度为10ppm。饵料为盐藻、小球藻干粉1∶3混合。单体培养时,利用新鲜的培养液,并加EDTA钠铁,终浓度为10ppm。每次产仔后更换的培养液亦为新鲜的培养液。
卤虫卵生的控制条件为:与卤虫卵胎生的控制条件基本相同,区别是:群体培养时,光照周期LD8∶16,光照强度约150lx。单体培养时,利用卤虫群体培养水槽中的培养液(旧培养液,含有卤虫代谢废物等),光照周期LD8∶16,光照强度约100lx。每次产仔后更换的培养液亦为旧培养液。