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本试验旨在研究日粮中添加枯草芽孢杆菌对樱桃谷肉鸭增重、肠道形态、免疫器官指数、先天性免疫应答的影响以及对禽致病性大肠杆菌和新型鸭呼肠弧病毒抵抗力的影响。选取体重相近、健康的1日龄樱桃谷肉鸭240只,随机分为2组,每组3个重复,每个重复40只鸭子。I组为对照组,饲喂基础日粮,II组为试验组,在基础日粮的基础上添加1×10~6 CFU/g的枯草芽孢杆菌,试验周期为35天。通过测定樱桃谷肉鸭的体重、肠道形态、免疫器官指数以及感染禽致病性大肠杆菌和新型鸭呼肠弧病毒后的存活率,研究枯草芽孢杆菌对樱桃谷肉鸭增重及免疫功能的影响,应用qRT-PCR技术检测胸腺和脾脏中免疫相关基因的表达情况,进一步研究枯草芽孢杆菌增强樱桃谷肉鸭免疫功能的分子机制。试验结果如下:1.增重:在饲喂后1-14日,枯草芽孢杆菌组与对照组相比,樱桃谷肉鸭的平均总增重和平均日增重差异不显著(P>0.05)。在饲喂后14-28日,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭平均总增重和平均日增重显著高于对照组,分别提高了41.7%和42.0%(P<0.05)。在1-28日,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭平均总增重和平均日增重显著高于对照组,分别提高了21.9%和21.7%(P<0.05)。2.肠道形态:枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭十二指肠和空肠的绒毛高度显著高于对照组,分别提高了4.7%和15.9%(P<0.05),而回肠的绒毛高度与对照组相比则无显著差异(P>0.05)。枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭十二指肠的隐窝深度显著低于对照组(P<0.05),而空肠和回肠的隐窝深度与对照组相比则无显著差异(P>0.05)。枯草芽孢杆菌组十二指肠和空肠绒毛高度与隐窝深度的比值显著高于对照组,分别提高了25.9%和30.7%(P<0.05),而回肠绒毛高度与隐窝深度的比值与对照组相比无显著差异(P>0.05)。说明枯草芽孢杆菌能够改善肠道形态,促进动物对营养物质的消化和吸收。3.免疫器官指数:在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭的胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数均显著高于对照组,分别提高了52.4%、122.8%、50.0%(P<0.05);在饲喂后第28天,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭只有法氏囊指数显著高于对照组(P<0.05),而脾脏指数和胸腺指数与对照组相比无显著差异(P>0.05)。说明枯草芽孢杆菌能在一定程度上能促进免疫器官的发育。4.免疫相关基因表达:(1)胸腺中免疫相关基因表达情况:在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组只有RIG-I显著上调,而MDA5、TLR3和TLR7的表达量与对照组相比无显著差异;在饲喂后第28天,枯草芽孢杆菌组MDA5、RIG-I和TLR3的表达与对照组相比显著上调,MDA5表达上调100倍(P<0.01),TLR3的表达上调了97.64倍(P<0.01),而RIG-I的表达上调了10倍(P<0.01)。在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组与对照组相比樱桃谷肉鸭IFN-α表达显著上调,上调了3.73倍(P<0.01),而IFN-γ和IFN-β表达无明显变化;此外,在饲喂后第28天,IFN-α和IFN-γ表达分别上调了4.56倍和14.69倍(P<0.01),而IFN-β的表达下调了0.24倍。在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10的表达与对照组相比无明显变化;而在饲喂后第28天,IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10显著上调,特别是IL-6表达上调了66.78倍(P<0.01)。在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组与对照组相比,抗病毒蛋白PKR、OAS和MX表达无明显变化;而在饲喂后第28天,枯草芽孢杆菌组PKR和MX的表达量分别上调了12.33倍和104.99倍(P<0.01),OAS的表达仍无显著差异。(2)脾脏中免疫相关基因表达情况:在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭与对照组相比,MDA5、RIG-I、TLR3和TLR7表达均上调;在饲喂后第28天,MDA5、RIG-I和TLR3表达显著上调,特别是TLR3上调了920.29倍(P<0.01),而TLR7表达无明显变化。在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭与对照组相比,脾脏中的I型和II型干扰素表达上调(IFN-α上调2.94倍;IFN-β上调2.28倍;IFN-γ上调2.54倍(P<0.01);在饲喂后第28天,枯草芽孢杆菌组IFN-γ上调6.35倍(P<0.01),而IFN-β表达无明显变化。在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组只有IL-6上调2.29倍,而IL-1β和IL-8无明显变化;在饲喂后第28天,IL-10的表达明显上调,而IL-1β、IL-6和IL-8的表达并无明显的变化。在饲喂后第14天,枯草芽孢杆菌组抗病毒蛋白PKR和MX表达均上调,而OAS的表达无显著变化;在饲喂后第28天,只有抗病毒蛋白MX表达显著上调。说明枯草芽孢杆菌能够激活模式识别受体,从而诱导下游细胞因子及抗病毒蛋白的表达,增强樱桃谷肉鸭的先天性免疫应答。5.抗病力:感染禽致病性大肠杆菌和新型鸭呼肠弧病毒后,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭的存活率均显著高于对照组。感染禽致病性大肠杆菌后,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭的存活率为43.3%,对照组为20.0%。感染新型鸭呼肠弧病毒后,枯草芽孢杆菌组樱桃谷肉鸭的存活率为100.0%,对照组为83.3%。这与上述结论相符,枯草芽孢杆菌能增加樱桃谷肉鸭的体重,改善肠道形态,促进免疫器官的发育,增强先天性免疫应答,进而提高机体的抗病力。综上所述,日粮中添加枯草芽孢杆菌能够提高樱桃谷肉鸭的增重,改善肠道形态,提高免疫器官指数,增强先天性免疫应答,提高樱桃谷肉鸭对禽致病性大肠杆菌和新型鸭呼肠弧病毒的抵抗力,为枯草芽孢杆菌在养鸭业的应用奠定了理论基础。