几株高等真菌发酵产物抑菌活性研究

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高等真菌中含有丰富的活性物质,在天然产物农药研究迅速发展的今天,其已成为继微生物源农药和植物源农药之后研究的另一热点。本文以几株高等真菌发酵产物-菌丝体和发酵液为研究对象,对其生物活性进行了系统研究,并采用活性追踪法,对其中的活性成分进行了分离鉴定,主要得出以下结论:1.采用叶碟法测定了供试高等真菌的发酵液和菌丝体丙酮提取物对3龄粘虫和小菜蛾的毒杀活性。结果表明,供试菌株的发酵产物均无明显杀虫活性。2.采用生长速率法测定了供试高等真菌的发酵液和菌丝体丙酮提取物对14种病原菌菌丝生长的抑制作用,结果发现在供试浓度为0.5mg·mL-1(菌丝干重)时,鳞柄小奥德蘑(Oudemansiella furfuracea var. furfuracea)发酵菌丝体丙酮提取物和双脆奥德蘑(Oudemansiella furfuracea var.bispota)发酵菌丝体丙酮提取物对供试的14种病原菌菌丝生长均有抑制作用,其中鳞柄小奥德蘑菌丝体丙酮提取物对烟草赤星病菌、苹果炭疽病菌、玉米小斑病菌、苹果腐烂病、玉米大斑病菌和番茄灰霉病菌6种病原菌有较好的抑制作用,抑制率均在80%以上;在供试浓度为10mg·mL-1(发酵液中干物质含量)时,鳞柄小奥德蘑发酵液和硫磺菌(Laetiporus sulphureus)发酵液对供试的14种病原菌菌丝生长均有抑制作用,其中鳞柄小奥德蘑发酵液对玉米小斑病菌、小麦赤霉病、玉米大斑病菌和番茄灰霉病菌4种病原菌有较好的抑制作用,抑制率均在70%以上,硫磺菌发酵液对棉花枯萎病菌、苹果黑斑病菌、玉米小斑病菌3种病原菌有较好的抑制作用,抑制率均在65%以上。由此筛选出高活性菌株为鳞柄小奥德蘑。3.在盆栽试验条件下,测定了鳞柄小奥德蘑发酵液和菌丝体丙酮提取物对小麦白粉病和玉米大斑病的防治效果。在供试浓度为0.5mg/mL(菌丝干重),鳞柄小奥德蘑菌丝体丙酮提取物对小麦白粉病的治疗效果和保护效果分别为63.8%和74.9%;对玉米大斑病的治疗效果和保护效果分别为62.8%和61.9%。鳞柄小奥德蘑发酵液在供试浓度为10mg/mL下对小麦白粉病和玉米大斑病的防治效果均不及菌丝体丙酮提取物的防治效果,说明鳞柄小奥德蘑发酵产物的抑菌活性成分集中在发酵菌丝体中。4.测定了鳞柄小奥德蘑发酵菌丝体4种提取物对植物病原菌的抑制作用,结果表明,鳞柄小奥德蘑发酵菌丝体中的抑菌活性成分主要集中于石油醚和乙酸乙酯提取物中。在供试浓度为0.5mg·mL-1时,石油醚提取物对苹果轮斑病菌、苹果炭疽病菌、番茄早疫病菌、苹果腐烂病菌和番茄灰霉病菌5种病原菌有较好的抑制作用,抑制率都达到90%以上;乙酸乙酯提取物对供试的10种病原菌菌丝生长均有较好的抑制作用,对苹果轮斑病菌和苹果炭疽病菌的抑制率均达100.0%。5.在活性追踪指导下对鳞柄小奥德蘑发酵菌丝体的抑菌活性成分进行分离。采用常压柱层析和薄层层析等技术,从石油醚和乙酸乙酯提取物中分离得到2个单体化合物。在供试浓度为0.5mg·mL-1时,化合物Ⅰ对枯草芽孢杆菌、腊状芽孢杆菌抑菌圈直径都在15mm以上,对玉米大斑病菌、苹果炭疽病菌2种病原菌孢子萌发抑制率均在70.0%以上;在供试浓度为0.50mg·mL-1时,化合物Ⅱ对枯草芽孢杆菌、腊状芽孢杆菌抑菌圈直径都在10mm以上,对玉米大斑病菌、苹果炭疽病菌2种病原菌孢子萌发抑制率均在50.0%以上。经鉴定,化合物Ⅰ是麦角甾醇,化合物Ⅱ是卫矛醇。
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