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第一部分,对实验室筛选出的3株同时携带blaNDM-1和blaCTX-M-15的碳青霉烯类耐药肠杆菌科菌株进行耐药表型验证、耐药基因PCR检测、细菌多位点序列分型(MLST)、耐药基因质粒定位、耐药基因接合转移等分子特征研究,并通过生长速率的测定对菌株携带抗性基因的适应性代价进行评价。第二部分,建立了K.pneumoniaeATCC(?)BAA 2146感染小鼠脓毒症模型,通过测定WBC、PCT及CRP等生化指标验证模型的可靠性,使用液相质谱联用技术对小鼠感染后2h、4h、8h和12h的血浆代谢物进行非靶向分析,对获得数据进行单变量统计分析和多元变量统计分析,筛选出差异代谢物,寻找脓毒症相关生物标志物,并进行代谢通路分析。对3株产NDM-1和CTX-M-15的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌进行的分子特征分析表明,菌株对氨曲南和美罗培南均高度耐药,并且除blaNDM-1和blaCTX-M-15外,菌株同时携带有介导氨基糖苷类、喹诺酮类、β-内酰胺类耐药的多种基因。MLST结果显示K.pneumoniae 1705和1706为ST449型,E.coli13-1为ST2型,均为已知ST型。S1-PFGE和Southern blot分析表明,菌株携带的blaCTX-M-15和blaNDM-1基因分别位于不同大小的质粒上,且均可以发生接合转移,但通常只能获得携带其中一种耐药基因的接合转移子。以E.coll C600为受体菌的接合转移子没有表现出明显的适应性代价,而在E.coll J53为受体菌时可以观察到较高的适应性代价。在肺炎克雷伯杆菌感染小鼠脓毒症模型的非靶向代谢组学分析中,成功建立了 K.pneumoniae ATCC@BAA2146感染小鼠脓毒症模型,经主成分分析和偏最小二乘法判别分析,结合变量投影重要度与非参数检验共筛选鉴定出58种可能与小鼠肺炎克雷伯杆菌ATCC(?)BAA 2146脓毒症相关的代谢物。相关的代谢通路分析发现其中18种代谢物与烟酸和烟酰胺代谢、嘧啶代谢、维生素B6代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢以及甘油磷脂代谢等8个代谢通路密切相关。