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Rab7属Rab (Ras-like protein in rat brain)家族,具有介导晚期胞内体与溶酶体的膜融合、参与晚期蛋白转运到溶酶体过程的特定生物学功能。Rab7除了参与内吞过程的晚期蛋白转运外,还参与了信号转导、细胞凋亡以及抗原递呈等生理过程。但目前关于Rab7与Toll样受体(Toll-Like Receptor, TLR)信号转导关系研究甚少。我们成功地从小鼠巨噬细胞RAW264.7中克隆到了Rab7的编码区,并构建了真核表达载体pcDNA-Rab7,为进一步研究Rab7与TLR的关系奠定了基础。主要研究结果如下:利用RT-PCR方法扩增Rab7的基因开放读码框,并构建了其真核表达载体pcDNA-Rab7。通过生物信息学分析,基序(Motif)分析结果显示,Rab7的蛋白含有一个保守的Rab结构域、一个ATP/GTP结合基序及多个蛋白激酶位点。pcDNA3.1、pcDNA-Rab7由Lipofectamine 2000瞬时转染RAW264.7细胞后,通过中性红染色法测定巨噬细胞的吞噬功能,与对照组相比,发现Rab7对RAW264.7细胞吞噬功能没有显著影响。我们利用瞬时转染野生型Rab7、失活型的Rab7/T22N的小鼠巨噬细胞RAW264.7,实验结果表明,Rab7高表达后,抑制了LPS诱导的IL-6和IL-1β的产生,而失活突变的Rab7阻断了这种抑制效应。以上结果表明,Rab7在进化过程中相对保守,因此更具有研究意义。Rab7在巨噬细胞中可能是通过其它途径来发挥其功能的。由于细胞因子是TLR信号转导的主要输出结果,所以我们的研究结果初步表明Rab7抑制了LPS诱导的TLR4的信号转导。