野生型与耐盐型短芒大麦基因序列差异和盐碱胁迫条件下基因表达差异的研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuhuizuizong
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土壤盐碱化的危害日益严重,因此,研究植物耐盐胁迫机理具有重要意义。本文选择了中度耐盐碱的短芒大麦为实验材料,比较分析了野生型和耐盐型短芒大麦耐盐机制的差异。首先使用不同浓度梯度的NaHCO3分别处理野生型短芒大麦,最终确定了最适的处理浓度:100mM NaHCO3.在后续的实验中,运用AFLP技术分析出野生型和耐盐型短芒大麦基因序列的差异,得到4条与非生物胁迫相关的基因片段;说明通过AFLP技术是可以筛选到野生型和耐盐型短芒大麦中与盐碱相关的差异基因片段的;同时利用cDNA-AFLP以及Blast软件等技术分析,找到了在野生型和耐盐型短芒大麦有差异的7个转录片段,下一步,可将此片段连接到表达载体,通过转基因等手段在植物中过表达来验证植物的耐盐性是否有所提高。通过本研究,我们分别在基因组水平和基因转录水平找到了再野生型和耐盐型短芒大麦中有差异的盐碱相关片段,为盐碱调控网络的完善奠定了基础,同时为盐碱胁迫条件下植物分子育种提供了可以利用的基因资源。实验过程中采用了生理实验确定植物合适的处理浓度,反转录半定量PCR、AFLP、巢式PCR、cDNA-AFLP等实验技术和手段解析出野生型和耐盐型短芒大麦在盐碱胁迫条件下响应机制的异同,同时筛选得到了在盐碱胁迫条件下有明显应答反应的基因序列,为今后植物耐盐碱机理研究和耐盐碱植物育种工作提供了理论依据。
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