基于转录组的亚洲小车蝗气味结合蛋白基因的鉴定及其表达谱分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:fy9876
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嗅觉感受系统在昆虫取食、寻找寄主、躲避天敌、交配和产卵等一系列生命活动中发挥了重要作用;在昆虫嗅觉感受系统中,气味分子结合蛋白(odorant-binding protein, OBP)扮演着重要的角色。本研究利用第二代高通量测序技术在亚洲小车蝗(Oedaleus asiaticus)触角中首次鉴定出15个编码OBP的基因,命名为OBP1-15,并对其表达谱进行了测定与分析,此外,又对亚洲小车蝗OBP与包括东亚飞蝗在内的其它六种昆虫的OBP进行了系统发育分析。主要结果如下:1.亚洲小车蝗雌、雄成虫触角转录组测序、数据分析及气味分子结合蛋白基因的鉴定。通过对亚洲小车蝗成虫雌、雄触角分别进行转录组测序,获得总clean reads数分别为137,426,706和127,822,838;总clean碱基数分别为12,368,403,540 nt和11,504,055,420 nt,均超过10GB,经过软件组装后,共获得61,629条all-unigene,其中有26,064(42.30%)条all-unigene获得了功能注释信息。首次在亚洲小车蝗成虫触角中鉴定出15个OBP基因,分析发现它们均具有全长开放阅读编码框(open reading frame, ORF)。2.亚洲小车蝗气味分子结合蛋白基因表达谱测定。通过实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)实验,发现只有OBP7在雌触角中的表达量要远大于在雄触角中的表达量;有9个OBP在雄触角中的表达量要大于在雌触角中的表达量。通过半定量PCR实验,发现OBP9和OBP10只特异性的表达于触角,而其它OBP则在触角、口器或翅膀等化学感受组织中表达。3.亚洲小车蝗OBP与其他昆虫OBP系统发育分析。通过对亚洲小车蝗15个OBP与其它来自于六个不同目的六种昆虫OBP氨基酸序列之间构建的进化树进行系统发育分析,发现亚洲小车蝗的大部分OBP都与东亚飞蝗(Locusta migratoria) OBP亲缘关系最近,但是亚洲小车蝗有些OBP并不是与东亚飞蝗亲缘关系最近。这表明二者的OBP基因最初由同一个祖先基因进化而来,但是为了适应不同的生态环境,各自进化出了独特的化学感受系统。
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