甜瓜IQD基因家族鉴定及CmIQD1、CmIQD31功能的初步探究

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甜瓜是一种全球广泛种植的葫芦科园艺作物,其果实拥有丰富的营养价值,是重要的水果之一。本研究以甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumis melo L.cv Hetao melon)作为研究材料,对甜瓜IQ67 DOMAIN(IQD)基因家族进行了鉴定,并选择了CmIQD1(MELO3C025505)、CmIQD31(MELO3C002201)两个IQD基因家族成员进行研究,取得的主要结果如下:(1)以拟南芥IQD基因家族成员为参照,筛选鉴定出29个甜瓜IQD基因,通过编码蛋白的系统进化树分析可将其分为4个亚家族;甜瓜IQD基因家族与番茄、黄瓜共同拥有19个同源基因。(2)酵母双杂交实验表明CmIQD1、CmIQD31无自激活现象,CmIQD31与Cm CML13有相互作用;亚细胞定位实验表明甜瓜CmIQD1、CmIQD31蛋白定位于细胞膜。(3)构建了CmIQD1、CmIQD31基因的过表达载体和基因编辑载体,通过子房注射法共获得69颗导入瓜果实,四个重组载体p CAMBIA-IQD1、p CAMBIA-IQD31、p HSE401-IQD1、p HSE401-IQD31 T1代种子的平均阳性率分别为:3.3%、3.6%、2.6%、3.1%;通过T1筛选、T2加代,获得并统计T3转基因纯合株系果实的果实重量、果实纵横径等数据。(4)经检测及统计,CmIQD1过表达三个株系CmIQD1-Oe1、CmIQD1-Oe2、CmIQD1-Oe3的平均果形指数为:1.17,显著性高于对照果实的平均果形指数1.09;CmIQD31三个株系CmIQD31-Oe1、CmIQD31-Oe2、CmIQD31-Oe3的平均果重为:1308.4 g,显著性重于对照果实的平均果重1149.4 g。(5)经统计发现CmIQD1过表达三个株系叶片的平均长度为5.2 cm,显著性短于对照叶片的平均长度6.2 cm,CmIQD1过表达三个株系叶片的平均宽度为7.9 cm,显著性宽于对照叶片的平均宽度7.0 cm;CmIQD31过表达三个株系的平均长度6.3 cm与对照叶片的平均长度6.2 cm无显著性变化,叶片的平均宽度为8.1 cm,显著性宽于对照叶片的平均宽度7.0 cm。综上所述,基因CmIQD1过表达会导致甜瓜果实的果形指数增加、叶片长度减小、叶片宽度增加,对果实的重量没有显著性影响;CmIQD31过表达会导致果实的重量增加、叶片的宽度增加,对叶片的长度和果实的果形指数没有显著性影响。
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