加工前、后亳州牡丹皮的药效学对比研究

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目的:在时代的进步、科技的发展下,生活节奏的加快,人们的饮食搭配发生了巨大的改变,饮食中的能量摄入量在不断的增加,运动量却在相对的减少。高血压、高血脂、糖尿病,心肌梗死等心脑血管疾病的发病率在不断的提高,且有逐年上升的趋势。中药牡丹皮在以往的研究中已经证实对糖尿病和心肌缺血再灌注都有较好的治疗效果。质量好的药材能有良好的治疗作用,但是质量差的药材不但不能起到治疗的作用,反而会给病痛的身体雪上加霜。目前,在中药市场中存在着一种不成文的做法,即中药材在进行炮制之后,为了能延长药材的保质时间,大部分商家都会将炮制后的药材再增加一道工序一用硫磺熏制。这样的就能使药材从外观上既美观又能保证药材存放时间的长久。亳州作为中国较大的中药材批发市场,聚集了来自全国各地的中药材贩卖的商家。根据中药材的这一现状,笔者通过在亳州购买的当地种植的、经硫磺熏制前、后的牡丹皮进行研究。本文研究的主要目的是将经硫磺熏制前、后的牡丹皮用于治疗治疗糖尿病和心肌缺血再灌注损伤,观察经过硫磺熏制后对其药效是否存在影响,且把影响的程度做一对比。通过实验的比较得出较为科学的证据说明硫磺熏制这样一道工序的作用是否有必要。方法:1、将健康的SPF级雄性昆明小鼠适应性饲养3天,用自制的高脂饲料喂养4周后,一次性给小鼠腹腔注射STZ溶液,造成高血糖状态,以血糖≥11.1mmol·L-1的小鼠作为Ⅱ型糖尿病模型的标准。将造模成功的小鼠随机分成5组,分别为:正常组、模型组、二甲双胍阳性组、加工前亳州丹皮组、加工后亳州丹皮组。正常组小鼠给予普通饲料,其余各组仍给予高脂饲料。连续给药4周。4周后,测定各组小鼠的糖耐量。摘取小鼠眼球取血,解剖取出小鼠的心、肝、脾、肺、肾,其中一部分肝脏、肾脏制成病理切片用于作显微观察,并测定小鼠血清中的GLU、TC、TG、SOD、MDA和NEFA含量。2、将购买的雄性Wistar大鼠适应环境3天后随机分为5组:正常组、模型组、假手术组、地奥心血康阳性组、亳州丹皮组,每组10只。连续灌胃14天。14天后,于末次给药1h后称重,麻醉,连接Ⅱ导联心电图。从颈部正中切开皮肤,分离气管,气管插管,连接小动物呼吸机进行机械通气。在三四肋间开胸,切开皮肤,钝性分离肌肉组织,打开胸腔,分离心包,使心脏跳出胸腔,结扎心脏左冠状动脉前降支,引起缺血。将心脏放回胸腔内,缺血30min后解开结扎,继续灌注60min。之后,剪开腹腔,腹主动脉取血,取大鼠的心、肝、肾,其中一部分心脏制成细胞凋亡用于作显微观察,并测定大鼠血清中的SOD、MDA、CK、LDH、GSH和NO含量。结果:1、从灌胃给药过程看,给予加工后亳州丹皮的小鼠死亡数目是加工前的一倍。从糖耐量结果观察,加工前、后亳州丹皮都能降低餐后的血糖浓度,两者之间无显著差异。与模型组比较,加工前、后亳州丹皮组均能显著降低Ⅱ型糖尿病小鼠的GLU、TC和MDA,并能显著提高Ⅱ型糖尿病小鼠的S0D,虽然加工前与加工后亳州丹皮的TC、TG、SOD、MDA和NEFA不存在显著性差异,但是从恢复程度而言,加工前比加工后的丹皮效果佳。2、与模型组比较,亳州丹皮组可明显降低血清中MDA、CK、LDH含量,升高SOD、GSH活性;亳州丹皮组血清中NO含量虽有升高,但与模型组比较无显著性差异。HE染色结果显示:亳州丹皮组心肌细胞较模型组排列整齐,且其他病理变化程度减轻。TUNEL染色结果显示:与模型组比较,亳州丹皮组可降低细胞凋亡指数,且具有显著性差异。结论:1、加工后的亳州丹皮在治疗糖尿病方面与加工前的亳州丹皮虽不存在显著差异性,这可能与加工后的丹皮被硫磺熏制的时间短和浓度小有关系但从部分指标和病理切片图观察的结果说明加工后的亳州丹皮疗效更佳,这仍与牡丹皮被硫磺熏制这一工序的存在有一定联系。2、加工后的亳州丹皮对实验性心肌缺血再灌注损伤的保护机制可能与清除氧自由基、保护氧自由基清除酶活性、增强缺血再灌注大鼠心肌抗氧化能力、抑制脂质过氧化物产生、减轻脂质过氧化所致心肌细胞膜的损伤有关;并提高内源性NO的生成,扩张冠状动脉,改善微循环,从而对心肌细胞起到保护作用。
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