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目的对处于生育年龄(小于40岁)而临床上诊断为高促性腺性闭经,基础FSH水平不明原因升高(大于13 mIU/ml)以及控制性超刺激(controlled ovarian hyperstimulation, COH)中卵巢低反应患者进行FSHR与LHCGR基因的突变检测,寻找发病原因,并提供对其生育进行指导的依据。方法收集16例病例的外周血,提取gDNA,应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增出患者FSHR和LHCGR基因的外显子及其侧翼序列,与正常人对应的PCR产物1：1混合后,应用变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography, DHPLC)技术对所有扩增子进行突变检测；DHPLC检出的可疑突变样本进一步测序。因FSHR基因的外显子5(FSHRe5)、FSHRe10-3、FSHRe10-5与LHCGR基因外显子1(LHCGRe1)、LHCGRe9位点的PCR产物DHPLC检测峰型不好,难以判断结果,所以采用直接测序法检测。结果应用PCR-DHPLC-测序或PCR-测序法对16位患者进行FSHR与LHCGR基因的各外显子及其侧翼序列进行突变检测,发现仅两位患者FSHR基因具有突变：患者一的FSHR基因的密码子(CDS)440发生GCA→GAA的错义突变,导致丙氨酸→谷氨酸,中性氨基酸转变成酸性氨基酸；该突变为HGMD(the Human GeneMutation Database)未记载的新突变,因此进一步对100个已生育的正常女性进行该位点的筛查,未发现该突变。患者二的FSHR基因发生了c.419delA的移码突变,导致在CDS155提前出现终止密码子TAA。没有发现LHCGR的突变。其余14名患者未发现突变。结论在1例高促性腺激素原发闭经的患者发现FSHR基因c.419delA的突变,在1例基础FSH水平不明原因增高的患者身上发现了FSHR基因具有CDS440GCA→GAA(丙氨酸→谷氨酸)突变。FSHR基因突变可能是导致这两位患者卵泡发育受阻与FSH、LH水平升高的原因。这两种突变均是HGMD未记载新突变,其中c.419delA为FSHR第一个缺失点突变。两者均是首次在中国人中发现的FSHR基因突变。同时我们明确了需进行FSH与LH受体基因诊断的病人标准。目的筛查结节性硬化症病人的基因突变,并应用于产前诊断防止TSC患儿的出生。方法应用PCR-DHPLC-测序技术,对近5年来我院就诊的14个家系的16名病人进行TSC1和TSC2基因的突变筛查,对峰型有异常者进行测序验证,必要时进行T／A克隆,针对HGMD未记载的新突变,筛查100名表型正常的无关个体,排除多态的可能。结果在14个家系的16个患者中确定了13个病人具有11种突变和4种多态,其中HGMD未记载的新突变9种,已记载的致病突变2种(TSC2R1743Q和TSC2c.4541-4544delCAAA)。所发现的突变包括4种缺失突变(TSC2 c.1143deG、TSC2 c.1957-1958delAG、TSC2 c.4541-4544delCAAA和TSC1 c.2672delA)、2种剪切突变(TSC2 Intron27+1 G>A和TSC2 Intron5+1 G>A)、3种错义突变(TSC2 R1743Q、TSC2 L847P和TSC1 N762S)和2种插入突变(TSC2 c.4918insCGCC和TSC2 C.910insCT)。其中TSC1基因中只发现了2种突变(N762S和c.2672delA),其余9种均为TSC2基因突变。对6个家系(家系1-4、8和9)进行了产前诊断,家系1-4和8的胎儿均未发现其家族中先证者的突变；胎儿出生后电话随访也无TSC的症状出现。而家系9携带有与其母亲一样的突变。结论联合应用PCR-DHPLC-DNA测序的方法,我院结节性硬化症的诊断率达81.25%,在家族性病例中TSC1与TSC2的突变比率接近1：1,而在散发性的病例中,TSC2的突变比例明显高于TSC1突变频率,我们的结果同以往的报道。11中突变中有9种突变均为新的突变,说明TSC基因有很高的新发突变频率。通过产前诊断,我们成功的防止结节性硬化症患儿的出生。