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以SPF级BALB/c小鼠为实验动物,检测协同刺激分子CD40L、CD28以及细胞因子IL-12、 IL-6和IL-8能否作为流感病毒表面抗原HA DNA疫苗佐剂,增强其抗流感病毒攻击的能力。分别用电击的方法将它们与HA DNA共免疫小鼠,免疫两次,间隔三周,加强免疫后一周,用致死量A/PR8/34(H1N1,40×LD50) 病毒滴鼻攻击小鼠。从免疫应答水平、动物的体重变化及保护率等几个方面检测其免疫佐剂效果。同时我们将多拷贝的CD40L与HA进行融合,衡量它的免疫效果。结果发现协同刺激分子CD40L和细胞因子IL-12及IL-8作为HA DNA疫苗佐剂的效果较好;而CD28、 IL-6则没有效果或效果不明显;多拷贝的CD40L与HA进行融合反而起到了抑制作用。其详细结果如下:(1) 体液免疫检测结果加强免疫前一天和加强免疫后十天取血,用ELISA法检测血清中的抗体,检测结果显示共同免疫CD40L和HA组抗体高于单独免疫HA组。细胞因子IL-12或IL-8与HA共同免疫后其抗体均高于单独免疫HA组。而CD28或IL-6与HA共同免疫后,与单独免疫HA组相比,抗体水平无明显区别。而将多拷贝CD40L与HA融合后,反而抑制了抗体水平。提示CD40L、IL-12和IL-8均能有效地增强HA引起的小鼠体液免疫应答。(2) 亚型抗体变化结果加强免疫后十天取血,用ELISA法检测血清中亚型抗体水平,结果显示CD40L、IL-12和IL-8均能有效地增强以提高IgG2a抗体为主的Th1型体液免疫应答。(3) 体重变化和存活率结果加强免疫后一周,用致死量A/PR/8/34(H1N1) 病毒滴鼻攻击小鼠,观察小鼠的死亡率和小鼠体重变化,结果显示较高剂量(30μg)CD40L能显著地减少小鼠体重丢失,而较低剂量(10μg)的IL-12和 11摘要IL一8均能显著地提高小鼠的存活率和减少小鼠体重的丢失。而CD28或IL一6对小鼠的存活率及体重变化与单独免疫HA组比较无明显差异。而将多拷贝CD40L与I诬A进行融合与单独免疫HA相比,反而加速了小鼠的死亡和增加了小鼠的体重丢失。