转Sporamin/Chitinase基因大豆胞囊线虫病和炭疽病抗性研究

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大豆是我国第四大种植作物,种植面积仅次于水稻、玉米和小麦,是重要的油料作物和蛋白质来源作物。作为大豆的起源地,中国曾是世界主要的大豆生产国及出口国。但是近十年来,中国大豆产量不仅不能满足内需而且还呈下降趋势,中国大豆产业面临困境。病虫害是影响大豆产量的重要因素之一,其中真菌病害与胞囊线虫病是危害较为严重的病害。传统的病害防治措施具有一定的局限性,随着分子遗传操作技术的逐渐成熟,通过基因工程构建环保、有效、便利的病害防治策略受到关注。  本实验室以大豆子叶节为外植体,采用农杆菌介导法将sporamin和chitinase基因转入大豆中得到了能够稳定遗传的T3-T5代转基因株系,本论文以7个转基因后代株系50、52、84、96、508、509、549及对照非转基因大豆为材料,接种大豆胞囊线虫与炭疽病菌。接种胞囊线虫后转基因植株与对照相比主根较长、侧根较多、植株长势较好、根部线虫侵染数目较少、死亡率低;7个株系发病程度不同,其中549、508病情最轻,但大田试验表明它们仍属于高感品种。接种炭疽菌实验表明平头炭疽菌菌株在PCA与PDA60两种培养基能较快生长产孢,孢子悬浮液离体接种优化方法可以快速鉴定叶片发病情况,七个转基因株系相对病斑面积均小于对照植株且与外源基因chitinase在叶片内的表达量存在负相关性。  本文实验结果显示转基因大豆植株与对照相比对胞囊线虫与炭疽病均具有一定的抗性。
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