玉米干旱诱导基因的克隆及功能鉴定

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干旱是影响玉米产量的重要的非生物胁迫因素,干旱等非生物胁迫能够诱导植物表达一些反应蛋白,这些蛋白在植物抗逆中起到重要作用。在本实验室构建的干旱盐碱共胁迫玉米全组织EST文库中,我们找到了一个干旱诱导基因片断,我们将其命名为RA33G4.用5`RACE的方法,我们获得RA33G4全长cDNA.RA33G4全长cDNA.含有478个碱基对,其ORF编码58个氨基酸,是一个含有两个跨膜区结构的小型蛋白。通过序列分析和相关文献,发现RA33G4属于一个高度保守的蛋白家族,该蛋白家族具有保持胁迫环境下的细胞结构的重要功能。 为了研究RA33G4基因在玉米抗旱过程中的作用,构建了RA33G4植物表达载体,将上述表达载体导入农杆菌并用于侵染玉米,使其在玉米中过量表达。经过PCR检测得到4株转基因玉米植株,定量PCR显示RA33G4在转基因玉米中表达量大量提高。对转基因株系进行5%的PEG浓度的模拟干旱胁迫,结果显示转基因苗较野生型植株萎焉度低,转基因植株显示出了明显的耐旱性,说明在玉米中大量表达RA33G4能提高玉米抗旱性。同时,我们建立了高效快速的玉米转化系统。
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