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第一部分γ-氨基丁酸受体GABA-A在海马区成熟星型胶质细胞上的功能性表达 研究目的:探讨γ-氨基丁酸受体 GABA-A在海马区成熟星型胶质细胞上的功能性表达。 研究方法:本实验利用全细胞膜片钳技术记录海马区成熟星型胶质细胞,在加入GABA,GABA-A受体阻断剂(SR95531),特异性GABA-A受体激动剂(THIP)后,分别利用电压钳技术观察星型胶质细胞膜电流的改变,利用电流钳技术监测星型胶质细胞膜电位的改变,进一步探索研究γ-氨基丁酸受体 GABA-A是否在海马区成熟胶质细胞上功能性表达。 研究结果:在电压钳模式下,加入GABA后诱导星型胶质细胞膜产生内向电流,这种内向电流大部分被SR95531所抑制;加入THIP后使得星型胶质细胞产生类似加入GABA后所诱导的内向电流,这种内向电流同样被SR95531所抑制。在电流钳模式下,加入GABA后诱导星型胶质细胞膜电位产生去极化,这种去极化现象大部分被 SR95531所抑制;加入 THIP后诱导星型胶质细胞的膜电位产生类似于加入GABA后的去极化现象,这种现象同样会被SR95531所抑制。 研究结论:大鼠海马区成熟星型胶质细胞上广泛存在γ-氨基丁酸受体 GABA-A,GABA-A受体在大鼠海马区星型胶质细胞上具有重要的功能。 第二部分GABA-A受体,GABA-B受体的激活对大鼠海马区成熟星型胶质细胞膜电位的影响及机制的研究 研究目的:探讨WCR和PPR的不同点;探索GABA-A受体,GABA-B受体的激活对星型胶质细胞的膜电位及膜电导的影响及其机制;.根据星型胶质细胞上的γ-氨基丁酸受体GABA-A介导的电流产生的反转电位计算出星型胶质细胞内cl的浓度。 研究方法:利用多烯抗生素短杆菌肽建立穿孔膜片钳模型,在穿孔膜片钳模型的基础上,探索γ-氨基丁酸受体GABA-A,GABA-B对星型胶质细胞膜电位及其膜电导的影响以及作用机理。 研究结果:1.在电流钳的模式下,加入 GABA后诱导产生膜电位的去极化,洗脱GABA后出现延迟的超极化现象;GABA-A受体的阻滞剂(SR95531)使得GABA引起的膜电位去极化的现象消失; GABA-A受体激动剂(THIP)能够诱导产生类似GABA引起的去极化反应,这种去极化现象被SR95531所抑制。2.在电压钳模式下进行穿孔膜片钳记录,加入特定的γ-氨基丁酸受体GABA-B的激动剂(baclofen),发现星型胶质细胞的被动膜电导跟随时间的延长而增强,将baclofen洗脱后,星型胶质细胞的膜电导依然进一步增强,并且出现膜电位的超极化。加入选择性γ-氨基丁酸受体GABA-B的阻断剂(CGP52432)后,Baclofen诱导的星型胶质细胞的膜电导的变化被抑制。 研究结论:1.在生理条件下,星形胶质细胞上的γ-氨基丁酸受体GABA-A的激活参与介导星型胶质细胞膜电位的去极化。2.γ-氨基丁酸受体GABA-B的激活使得星型胶质细胞的被动膜电导增强,并且诱导产生膜电位的超极化。