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束缚-浸水应激(restraint water-immersion stress,RWIS)是一种复合型刺激,强度较大,它在几个小时内产生的胃运动机能亢进、胃酸分泌增多、急性的胃黏膜损伤等现象都是由迷走神经介导的。临床上筛选治疗应激性胃溃疡的药物常选用该模型。Fos作为即刻早期基因(immediate early gene,IEG)c-fos的产物,常常用来检测神经元的活动状态。人所有的感觉和运动机能都是由神经系统完成的。神经系统是由神经细胞(nerve cell)和神经胶质细胞(neuroglia)构成的。神经细胞,也称神经元(neuron),是构成神经系统结构和功能的基本单位,具有接受刺激、整合和传导信息的功能。神经元之间信息交流的完成需要突触的参与,通过突触传递各种神经冲动,能够保障各种反射活动的顺利进行。保持突触数量上的相对恒定与结构功能上的完整性对生命活动尤其是脑功能的维持起着重要作用。突触彭体素(synaptophysin,SYN)与突触蛋白I(synapsin I)常被用作检测神经元突触可塑性的指标。前额叶皮层中的内侧前额叶(medial prefrontal cortex,mPFC)应激敏感性很高,丘脑中的核团与前额叶有大量的纤维联系,它们能调节很多的生理反应。然而,关于丘脑中的核团是否参与束缚-浸水应激,前额叶和丘脑中的神经元在束缚-浸水应激中的突触可塑性是否发生了改变,这些问题尚待解决。为此,我们设计了如下的实验方案来解决这些问题。随机将健康Wistar雄性大鼠分为应激组(RWIS1h)与对照组(RWIS0h),两组大鼠饥饿24h,对实验组大鼠进行束缚-浸水应激,对两组大鼠进行心脏灌流、剥离脑组织固定、冰冻切片等处理后,利用免疫组织化学Fos单标技术检测Fos阳性神经元的数目,以此来判断大鼠mPFC的边缘前区(prelimbic cortical area,PL)与边缘下区(infralimbic corticalarea,IL)、丘脑背内侧核(mediodorsal nucleus,MD)、丘脑室旁核(thalamic paraventricularnucleus,tPVN)、丘脑中央内侧核(central medial nucleus,CM)中的神经元是否参与该应激反应;随机将健康Wistar雄性大鼠分为RWIS1h、RWIS2h、RWIS4h和RWIS0h四组,饥饿后,对前三组大鼠进行束缚-浸水应激,利用免疫组织化学SYN、突触蛋白I单标技术检测SYN与突触蛋白I表达量的变化,以此来判定大鼠mPFC中PL与IL、丘脑MD、tPVN、MD中的神经元的突触可塑性是否发生了改变。获得的主要结果如下:1、实验组大鼠,与对照组相比,丘脑MD、tPVN、CM单位面积内的Fos阳性神经元数目均显著增多,表明丘脑的这三个核团均参与该应激反应,并发挥重要作用。2、实验组大鼠,与对照组相比,mPFC中左右两侧的PL、IL单位面积内的Fos阳性神经元数目均显著增多,这说明mPFC中PL、IL中的神经元均参与了该应激反应。3、应激不同时间段(RWIS1h、2h、4h),与对照组相比,丘脑MD、tPVN、CM内的SYN的累积光密度(integrated optical density,IOD)值均显著增加,这表明在应激过程中,丘脑内的三个核团中神经元的突触可塑性发生了不同程度的上调性改变。4、应激不同时间段(RWIS1h、2h、4h),与对照组相比,mPFC中左右两侧的PL、IL的SYN的IOD值均显著增加,这表明在应激过程中,mPFC中神经元的突触可塑性发生了不同程度的上调性改变。5、应激不同时间段(RWIS1h、2h、4h),与对照组相比,丘脑MD、tPVN、CM内的突触蛋白I的IOD值均显著增加,进一步表明在应激过程中,丘脑核团中神经元的突触可塑性发生了不同程度的上调性改变。6、应激不同时间段(RWIS1h、2h、4h),与对照组相比,mPFC中左右两侧的PL、IL的突触蛋白I的IOD值1h组显著增加,进一步表明在应激过程中,mPFC中神经元的突触可塑性发生了上调性改变。