论文部分内容阅读
[目的]通过观察血府逐瘀汤对高尿酸血症大鼠肾小管上皮细胞OAT3和URAT1的影响,初步探讨血府逐瘀汤促进肾脏尿酸排泄的机制,为临床应用提供依据。[方法]选用清洁级雄性Sprague-Dauley大鼠50只,体重200±10g,随机分为五组:正常组、模型组、血府逐瘀汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。正常组以蒸馏水灌胃;模型组、血府逐瘀汤低、中、高各组上午按腺嘌呤(100mg/kg)+盐酸乙胺丁醇(250mg/kg)灌胃,下午模型组给予蒸馏水灌胃,血府逐瘀汤低、中、高组以不同剂量(0.31g/kg、0.62g/kg、1.24g/kg)的血府逐瘀汤灌胃,所有动物给药体积为10ml/kg。连续灌胃2周后,腹腔注射乌拉坦以麻醉,腹主动脉采血,取左肾。检测各组大鼠血清UA、Scr、BUN的含量;采用光镜技术观察肾组织病理形态改变;免疫组织化学法检测大鼠肾小管上皮细胞OAT3和URAT1蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR法检测OAT3-mRNA和URAT1-mRNA的表达量。[结果]1.血清生化指标检测显示:模型组、血府逐瘀汤各组UA、Scr、BUN水平高于正常组(P<0.05或P<0.01);血府逐瘀汤中、高剂量组UA、Scr、BUN低于模型组(P<0.05或P<0.01)。2.肾组织病理形态学改变:模型组大鼠肾组织大量肾小管扩张,管腔内可见尿酸结晶,肾间质有大量炎细胞浸润,近曲小管上皮细胞变性、坏死;血府逐瘀汤高、中剂量组肾小管无明显扩张,管腔内偶见尿酸结晶,肾间质有少量炎细胞浸润。3.免疫组化检测显示:模型组、血府逐瘀汤各组OAT3阳性目标总面积和IOD值低于正常组(P<0.05或P<0.01),中、高剂量组OAT3阳性目标总面积和IOD值高于模型组(P<0.05或P<0.01);模型组、血府逐瘀汤各组URAT1阳性目标总面积和IOD值明显高于正常组(P<0.05或P<0.01),血府逐瘀汤中、高剂量组的URAT1阳性目标总面积和IOD值均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。4.Real-Time PCR检测显示:模型组、血府逐瘀汤各组OAT3-mRNA相对表达量明显低于正常组(2-ΔΔCt<0.5),血府逐瘀汤中、高剂量组OAT3-mRNA相对表达量高于模型组(2-ΔΔCt>2)。模型组URAT1-mRNA相对表达量明显高于正常组(2-ΔΔCt>2),血府逐瘀汤中、高剂量组URAT1-mRNA相对表达量低于模型组(2-ΔΔCt<0.5);[结论]1.血府逐瘀汤可降低高尿酸血症大鼠UA、Scr、BUN水平,改善肾功能。2.血府逐瘀汤可改善肾脏病理形态,保护、修复肾单位,减轻肾小管及肾间质的损伤,抑制炎症的发展。3.血府逐瘀汤可通过上调OAT3的表达,下调URAT1的表达,促进尿酸排泄,降低血尿酸水平。