云南元宝枫黄酮体外诱导肺癌细胞株YTMLC凋亡的实验研究

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目的:探讨云南元宝枫黄酮体外诱导个旧肺鳞癌YTMLC细胞株凋亡及其机制。方法:将不同浓度的云南元宝枫黄酮作用于个旧肺鳞癌YTMLC细胞及正常胎肺KMB-17细胞,并将每种细胞分为四组即阴性对照组、溶剂对照组、实验组(加入黄酮)和阳性对照组(加入DDP)。采用改良四甲基偶氮唑蓝(简称改良MTT)法测定不同时间和不同浓度黄酮对YTMLC细胞及KMB-17细胞的生长抑制作用;通过倒置显微镜、荧光显微镜、扫描电镜、透射电镜从细胞水平直接观察黄酮对体外培养的YTMLC细胞诱导凋亡的形态学改变。应用流式细胞术进行细胞周期分析和TUNEL法检测黄酮对YTMLC及KMB-17细胞细胞周期的影响以及凋亡的情况;应用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA片段化情况。结果:随着药物浓度的增加和作用时间的延长,云南元宝枫黄酮对YTMLC细胞及KMB-17细胞的抑制作用呈时间和浓度依赖关系24、48、72小时的IC50值分别为151.24±13.16μg/ml、108.53±8.22μg/ml、70.21±9.62μg/ml及621.13±14.58μg/ml、303.57±19.24μg/ml、189.93±12.62μg/ml;在形态学方面可见实验组及阳性对照组YTMLC细胞发生细胞皱缩变形,微绒毛消失,与相邻细胞解离,核内染色质发生凝聚并呈新月样、串珠样分布于核内周边,细胞核固缩、细胞膜卷曲陷入胞内等典型的凋亡细胞的形态改变而KMB-17细胞各组未见上述典型改变;流式细胞术显示实验组和阳性对照组YTMLC细胞凋亡率明显高于KMB-17细胞的实验组及阳性对照组,两者之间存在显著性差异(P<0.05)而其他各组凋亡率较低。细胞周期分析结果显示加入元宝枫黄酮后YTMLC细胞周期阻滞在S期。琼脂糖凝胶电泳法检测实验组及阳性对照组YTMLC细胞有凋亡存在。结论:云南元宝枫黄酮在体外可以对个旧肺鳞癌细胞株YTMLC产生生长抑制作用。元宝枫黄酮对肺癌细胞YTMLC的抑制作用是通过诱导肿瘤细胞的凋亡实现的,而对正常胎肺细胞
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