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植物在受到一些化学物质的诱导、盐害、病原物(如真菌、细菌、病毒)的侵染等逆境胁迫时,会发生一系列防卫反应,往往产生出一些新的蛋白质,即所谓的病程相关蛋白( pathogenesis-related protein,PRP)。根据最新的研究结果可知,PR蛋白可分为PR1、PR2、PR3、PR4等共17类,除PR1与抗真菌的关系比较密切外,其它PR蛋白的生物学功能,如抗盐、抗病毒等都有不同的报道。利用转基因技术对不同的PR蛋白基因进行功能分析,特别是其在抗病方面的研究已成为该领域的热点之一。本研究在克隆烟草病程相关蛋白PR1b基因(NCPR1b)、PR4a基因(NCPR4a)、水稻RSOsPR10基因(RSOsPR10)的基础上,构建了不同类型的植物表达载体,通过农杆菌介导法转化了普通烟草(Nicotiana tabacum NC89)、三生烟草(Nicotiana tabacum L.cv Samsun),获得了一系列转基因植株,并对这些转基因烟草的T1代植株进行了抗盐、抗病等生物学功能分析。主要实验结果如下:1.根据已报道基因序列,设计特异引物,利用RT-PCR,从普通烟NC89中克隆得到NCPR1b基因、NCPR4a基因,cDNA大小分别为506bp、460bp;从水稻(中花11)中克隆得到RSOsPR10基因,cDNA大小为586bp。2.构建了含NCPR1b基因的三种植物表达载体,即含正义NCPR1b基因的载体pBI-Z-PR1b、含反义NCPR1b基因的载体pBI-F-PR1b、含有核基质结合序列(MAR)的正义NCPR1b基因载体pMR-PR1b;构建了含正义NCPR4a基因的载体pBI-PR4a ;构建了含正义RSOsPR10基因的载体pROKⅡ-PR10。3.以普通烟草NC89为转化受体,采用农杆菌介导的方法,将pBI-Z-PR1b和pBI-PR4a分别转化,获得了两类转基因烟草植株,即含有pBI-Z-PR1b的转基因NC89(T-1),含有pBI-PR4a的转基因NC89(T-4);以三生烟草为转化受体,采用农杆菌介导的方法,分别将NCPR1b基因的三种植物表达载体、正义NCPR4a基因的载体、正义RSOsPR10基因的载体转化,获得了五类转基因烟草植株,即含有pBI-Z-PR1b的转