【摘 要】
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目的 胚胎干细胞(ESCs)是从囊胚内细胞团(ICM)或胚胎原始生殖细胞(PGCs)中分离、经体外抑制分化培养后筛选出来的具有多能性的细胞,在适当条件下,ES细胞可定向分化为几乎
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目的 胚胎干细胞(ESCs)是从囊胚内细胞团(ICM)或胚胎原始生殖细胞(PGCs)中分离、经体外抑制分化培养后筛选出来的具有多能性的细胞,在适当条件下,ES细胞可定向分化为几乎所有种类的细胞,甚至形成复杂的组织和器官。自1998年人胚胎干细胞成功建系以来,引发了新一轮研究胚胎干细胞的热潮。人胚胎干细胞(Human embryonic stem cell,hESC)及其体外定向诱导分化体系的建立,能够模仿乃至重现体内复杂的发育及组织器官的生成过程,而且具备能人工控制、干预和潜在的规模化、规范化与工艺化等特点;对在体外研究人胚胎发生、发育,通过基因修饰和染色体工程生产特定的细胞系,药物开发、毒理学研究时构建人类疾病之离体模型、作为研究多肽生长因子和分化因子的新型工具及细胞治疗、组织工程等诸多方面具有重要的作用。 目前,全球人胚胎干细胞成功建系的以hESs居多,国外建立hEGCs细胞系的仅一例;国内有分离PGC的报道,尚未成功建立hEGCs细胞系。建立胚胎干细胞的体外培养的常规模式,研究和改进保持其全能性和不断增殖能力的培养条件,是研究胚胎干细胞在各个领域应用的重要前提和基础。 本研究尝试通过胚胎干细胞的体外培养,熟悉研究胚胎干细胞的技术路线,对分离出的胚胎干细胞进行体外分化抑制培养并对其加以鉴定;初步掌握人胚胎干细胞分离、建系的技术和方法,探索有效诱导人胚胎生殖细胞为神经细胞的途径,为相关基础研究和临床应用奠定基础。 方法 1.分别以昆明小鼠和人流产胚胎生殖嵴为材料分离内细胞团和原始生殖细胞,种植在小鼠和人胎儿成纤维细胞制成的饲养层上进行扩增培养及
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