孕期铁缺乏对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴影响的研究

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目的:建立大鼠围产期铁缺乏模型并观察其一般状况,检测大鼠围产期血液学参数:血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、红细胞平均体积(MCV)、血细胞比容(PCV或HCT)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW),铁蛋白(Fn),促红细胞生成素(EPO)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1),同时检测大鼠围产期内分泌腺体激素分泌水平,观察其子代是否出现低出生体重现象;探讨新生鼠内分泌腺体和肝组织促红细胞生成素受体(EPOR)表达情况以及新生鼠肝脏组织EPO和IGF-1浓度是否受亲代铁缺乏的影响;初步完成下丘脑、垂体、肾上腺体外培养尝试,为后期下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)分泌功能的研究做铺垫。方法:选择健康Wistar雌鼠32只,适应性饲喂1周后,随机分为实验组和对照组,实验组用含铁元素10.0mg/Kg的低铁饲料饲养,对照组以含铁元素216.0mg/Kg的对照组饲料饲养,其他条件均相同,开始干预。干预4周后再与健康雄鼠同笼交配,雌鼠孕期继续低铁饲料干预直至分娩,在围产期检测孕鼠的Fn、EPO、IGF-1和血液学指标,同时检测内分泌腺体分泌的相关激素。子代出生后,观察新生鼠出生情况并称其出生体重。取新生鼠的丘脑、垂体和肾上腺及肝脏组织等,将这些组织制成组织切片,观察其EPOR的表达情况,同时用肝组织制备组织匀浆检测其EPO和IGF-1水平,另外对丘脑、垂体和肾上腺进行体外培养尝试,利用人促红细胞生成素刺激单一内分泌腺体细胞,检测内分泌腺体分泌的相应激素:生长激素(GH)、生长激素释放激素(GHRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、肾上腺素(EPI)及皮质酮(CORT)等水平变化。结果:①大鼠围产期铁缺乏模型成功建立。围产期实验鼠Hb、MCV、PCV、MCH、Fn、IGF-1、GH及CORT明显低于对照组,两组比较,差异有统计学意义(p<0.05);而RDW,血浆ACTH、GHRH、EPI,血浆和肝组织匀浆EPO水平均显著增加,两组比较,差异有统计学意义(p<0.05);②实验组大鼠出现难产现象,并且其新生鼠死胎率较对照组高;与对照组相比,实验组新生鼠肝组织匀浆中IGF-1显著降低(p<0.05);③实验组新生鼠的垂体,肾上腺,肝脏都有EPOR表达,略高于对照组;④初步掌握下丘脑、垂体、肾上腺的体外培养技术;⑤EPO刺激内分泌腺体细胞,其激素分泌水平实验组与对照组差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1.大鼠围产期铁缺乏模型成功建立。2.大鼠围产期铁缺乏使亲代Fn、EPO、GH、IGF-1、GHRH、ACTH、EPI、CORT发生变化,同时对子代出生体重也有一定影响。3.已初步掌握围产期铁缺乏大鼠其新生鼠下丘脑、垂体、肾上腺的体外培养技术,为后期下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌功能研究奠定了实验基础。
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