人乳腺癌细胞HYAL1基因的转染及其研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zgrmxm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分人乳腺癌细胞HYAL1基因真核表达载体的构建及其在MCF-7和ZR-75-30细胞中的表达目的构建人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体并稳定转染HYAL1基因低表达的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞株,为进一步探讨HYAL1基因在乳腺癌的侵袭和转移中的作用奠定基础。方法采用RT-PCR技术从高表达HYAL1的人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S中扩增透明质酸酶HYLAL1基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建的重组表达质粒经脂质体介导转染HYAL1基因低表达的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞。结果用RT-PCR成功地扩增出1条1332bp的DNA片段,经限制性内切酶酶切分析和DNA测序证明已经成功构建了人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体。RT-PCR证明转染了重组质粒的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞可以高效稳定的表达HYAL1基因。结论成功构建了人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体,获得了稳定表达人HYAL1基因的MCF-7和ZR-75-30细胞克隆。第二部分HYAL1基因过表达对乳腺癌细胞迁移能力的影响目的探讨透明质酸酶HYAL1基因的过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7和ZR-75-30的迁移能力的影响。方法应用双室联合培养技术,建立体外肿瘤侵袭模型,观察过表达HYAL1基因对乳腺癌细胞穿透ECM gel的能力变化的影响。结果过表达HYAL1基因的乳腺癌细胞MCF-7 and ZR-75-30(实验组)穿透ECM的能力强于对照组明。结论过表达HYAL1基因能促进人乳腺癌细胞在体外侵袭能力。第三部分HYAL1基因过表达对肿瘤细胞血管生成能力的影响目的探讨透明质酸酶HYAL1基因的过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7和ZR-75-30的血管生成能力的影响。方法应用双室联合培养技术,建立体外肿瘤血管生成模型,观察过表达HYAL1基因对乳腺癌细胞诱导血管内皮细胞形成血管能力的影响结果过表达HYAL1基因的乳腺癌细胞MCF-7 and ZR-75-30(实验组)诱导血管生成的能力均强于对照组结论过表达HYAL1基因能促进人乳腺癌细胞在体外诱导血管生成。第四部分HYAL1基因过表达对乳腺癌细胞株增殖的影响目的探讨透明质酸酶HYAL1基因的过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7和ZR-75-30增殖的影响。方法应用MTT和流式细胞术检测细胞的增殖能力变化。结果过表达HYAL1基因的乳腺癌细胞的增殖能力没有明显差异。结论过表达HYAL1基因对乳腺癌细胞的增殖没有影响。
其他文献
随着经济水平的提高和人们生活方式的改变,冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)与非酒精性脂肪肝(NAFLD)的发病率呈逐年上升及年轻化趋势,两者之间的关系成为研究关注的热点。
在器官移植领域,移植血管占有重要地位,已成为治疗血管疾病的有效方法。迄今许多患血管疾病患者通过移植自身血管、同种异体血管获得新生。然而,有两个因素严重阻碍了临床血管移
尽管传统血运重建术取得了巨大进展,但缺血性心脏病的治疗仍然存在诸多不足。治疗性血管生成(therapeutic angiogenesis)通常所采用的两种方法,包括直接注射重组成血管因子的蛋
"肺痿"病名首见于《金匮要略》,以咳吐浊唾涎沫为主症。近年来部分学者认为肺纤维化与肺痿相对应,然而二者表现不尽相同。考证自汉以降中医文献,所载肺痿症状并不一致。仲景记
乳腺癌是影响女性健康的一种常见恶性肿瘤,全世界每年约有120万妇女发生乳腺癌,有50万妇女死于乳腺癌。中国是发展中国家,乳腺癌的发病却与发达国家相似,呈不断上升趋势。有资料
目的:探讨中药溃愈消治疗复发性口腔溃疡(ROU)的临床疗效。方法:将符合标准的116例ROU患者按照随机数字表法分为两组,每组58例,对照组给予维生素B2片、维生素C片口服,治疗组在对
脊髓损伤后如何促进神经功能的恢复和神经再生一直是基础研究和临床工作中的难题。目前普遍认为单一的治疗方法难以取得良好效果。胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)据认为是一
一、研究背景 自1967年Stanley Dudrick和Douglas Rhoads在临床上成功应用胃肠外营养(PN)以来,PN在临床上得到了广泛的研究和应用。我国从1971年开始开展PN,此后得到逐渐推广
背景:体外循环(CPB)是心内直视手术的必要技术之一,但CPB可造成机体多脏器损伤,其中肺损伤是CPB术后最常见的并发症,心内直视手术致急性呼吸功能不全的发生率高达15~30%。本研究从临
今年是改革开放40周年,改革开放留给我们的时代精神就是“逢山开路、遇水架桥的闯劲”,和“滴水穿石的韧劲”,是不懈奋斗、与时俱进,是革新除旧,拥抱未来。$$今天的西咸新区,继承着
报纸