目的：选用人巨细胞病毒（HCMV）抗原性强且亲水性高的基因片段构建的三种重组嵌合抗原，诱导、表达、纯化获得目的蛋白；采用ELISA法检测合肥地区孕妇、儿童等血清HCMV的感染情况，并平行比较构建的三种重组嵌合抗原的敏感性和特异性，并分析感染HCMV的孕妇、儿童、肿瘤疾病等相关危险因子。方法：通过Protean软件分析了的HCMV UL32、UL44、UL55、UL83、UL123序列，通过设计合理引物，各基因片段用Overlap PCR方法连接，并引入Bgl II、BamHI酶切位点，成功构建这三种重组质粒且经诱导表达，重组蛋白用Ni2+NTA亲和层析的方法纯化获得：HCMV pQE80-L-UL32-UL44-UL83、pQE80-L-UL32-UL44-UL-55-UL83、pQE80-L-UL32-UL44-UL-55-UL83-UL123。采用Western blot法检测免疫反应性。利用这三种重组蛋白作为抗原建立和优化了HCMV血清学检测ELISA方法，检测安徽合肥地区76例孕妇、150例呼吸道疾病儿童和43例肿瘤患者的血清。运用SPSS16.0软件对其结果进行分析处理。结果：成功构建了HCMV重组嵌合抗原表达质粒，并能够诱导表达于大肠杆菌中，并且也较高纯度的纯化出了目的蛋白，验证其具有较强的免疫反应性，建立重组抗原ELISA检测方法。与商业试剂盒比较其重组抗原的敏感度、特异性均为100%，而商业试剂盒的特异性为100%,敏感度为97.6%。①孕妇血清HCMV IgG阳性率为55.3%，其中，孕周在19~21周的孕妇感染率为75%，Logistic回归分析结果显示：HCMV感染率与孕妇孕周、年龄、AFP（甲胎蛋白）、HCG（人绒毛膜促性腺激素）、游离雌三醇（uE3）水平以及糖尿病均无显著差异性（P＞0.05）。②儿童血清HCMV阳性率为32.7%，Logistic回归分析结果显示：儿童年龄、淋巴细胞百分比水平及呼吸道感染中患MPP（肺炎支原体肺炎）与HCMV感染率之间有显著相关性（P＜0.05）；而性别、WBC（白细胞）、RBC（红细胞）、PLT（血小板）、CPR（C反应蛋白）水平与HCMV感染率之间均无显著相关性（P＞0.05）。呼吸道疾病儿童血清KSHV阳性率为16.7%，Logistic回归分析结果显示：儿童年龄、性别、WBC、RBC、PLT、淋巴细胞百分比及CRP水平与感染率之间均无明显相关性（P＞0.05）。③肿瘤患者HCMV阳性率为20.9%，其感染HCMV阳性的有9例，Logistic回归分析结果显示：年龄、性别、肿瘤均与HCMV感染率无显著相关性（P＞0.05）。④肿瘤患者KSHV阳性率为30.2%，其感染HCMV阳性的有13例，Logistic回归分析结果显示：肿瘤与KSHV感染率有显著相关性（P＜0.05）。HCMV IgG血清抗体阳性率与KSHV血清抗体阳性率之间比较，150份儿童血清中，HCMV IgG抗体阳性率为32.7%，KSHV抗体阳性率为16.7%，两抗体阳性率差异有统计学意义（χ2=9.93, P=0.002）。76例孕妇的血清HCMV IgG抗体阳性率为55.3%，KSHV感染阳性率为1.3%，两抗体阳性率差异有统计学意义（χ2=39.09, P=0.000）。43例肿瘤患者的血清中HCMV感染率为20.9%，KSHV感染率为30.2%，两抗体阳性率差异无统计学意义（χ2=1.125，P=0.289）。结论：构建了HCMV重组嵌合抗原表达质粒，并成功诱导表达于大肠杆菌中，且也较高纯度的纯化出了目的蛋白，验证其具有较强的免疫反应性，建立重组抗原的检测方法。在血清学检测中HCMV感染率与孕妇的孕周、AFP、HCG及雌激素水平均无相关性；其中肺炎支原体肺炎与HCMV感染率相关，以及在10.01～１2月和淋巴细胞比例大于40.01%均与HCMV感染率有显着相关性；提示HCMV感染与呼吸道感染之间有密切关系，认为可能是由于儿童HCMV活动期感染导致肺功能下降，免疫力低下诱发支原体肺炎的发生，诱使呼吸道感染反复发作；也可能是儿童MPP感染使免疫功能改变，增加其它病原菌对机体的侵袭。