蛹虫草发酵物化学成分及生物活性研究

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高等真菌中含有丰富的活性物质,在天然产物农药研究迅速发展的今天,其已成为继微生物源农药和植物源农药之后研究的另一热点。从高等真菌中分离纯化活性先导化合物对创制具有我国自主知识产权的新农药具有重要意义。鉴于此,本论文以蛹虫草液体发酵产物——菌丝体和发酵液为研究对象,采用生物活性跟踪法,对其中的化学成分进行抑菌杀虫研究,主要得出以下结论:1.对蛹虫草发酵液的乙酸乙酯和正丁醇萃取物进行了抗菌实验。结果表明,乙酸乙酯萃取物对细菌中的金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、变形杆菌、巨大芽孢杆菌、北京棒状杆菌和霉菌中的绿色木霉、黄曲霉有明显的抑菌作用;正丁醇萃取物对细菌中的马铃薯芽孢杆菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌、灵杆菌和霉菌中的绿色木霉以及黄曲霉有明显的抑菌作用,且提取物的抑菌作用随浓度增大而增强。说明蛹虫草发酵液中具有抗菌活性物质。2.采用叶碟法测定菌丝体和发酵液以及各萃取物对粘虫3龄幼虫的毒杀活性,结果发现在25mg/mL时菌丝甲醇总浸膏对粘虫有较强的拒食和毒杀活性,饲喂3d的校正死亡率58.25%。乙酸乙酯和正丁醇部分毒杀活性相对较弱,饲喂3d的校正死亡率分别16.67%和30.95%。发酵液各萃取物对3龄粘虫的毒杀活性较弱。3.另外测定了菌丝体甲醇提取物以及各萃取部分的抗病原菌活性,结果发现甲醇总浸膏在2mg/mL浓度下72h对苹果腐烂病菌、番茄灰霉病菌、番茄早疫病菌和葡萄炭疽病菌菌丝生长有明显抑制作用。乙酸乙酯部分在1mg/mL浓度下72h对棉花枯萎病、苹果腐烂、葡萄炭疽病菌菌丝生长的抑制率在60~80%之间;正丁醇部分在1mg/mL浓度下72h对番茄灰霉、番茄早疫菌病菌丝生长的抑制作用在60~70%之间。萃余水相在1mg/mL浓度下72h对苹果腐烂,番茄灰霉、番茄早疫病菌菌丝生长表现出一定的抑制作用。4.菌丝体乙酸乙酯萃取物经过柱层析分离纯化,鉴定出化合物5个,经GC-MS、EI(FAB) -MS、1HNMR、13CNMR及DEPT等波谱鉴定,并与标准品、文献值以及图谱库对照,确定其为棕榈酸;硬脂酸;油酸;4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮麦角甾烷;麦角甾醇过氧化物。
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