【摘 要】
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目的:研究GLI1和ARHGAP9共同单核苷酸多态性rs2228226(G>C)与胃腺癌术后患者的临床预后是否存在差异;初步探讨ARHGAP9在胃腺癌细胞中表达量的变化对其生物学行为的影响。以期在基因功能层面上揭示该单核苷酸多态性对胃腺癌的作用机制,为rs2228226成为胃腺癌的新型生物学标志物提供依据。方法:(1)课题组前期利用DHPLC和质谱分析技术对661例p T4a胃腺癌术后患者的病理组
【基金项目】
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南京军区福州总医院胃癌创新团队基金(No.2014CXTD04); 福建省自然科学基金(2017J01215)
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目的:研究GLI1和ARHGAP9共同单核苷酸多态性rs2228226(G>C)与胃腺癌术后患者的临床预后是否存在差异;初步探讨ARHGAP9在胃腺癌细胞中表达量的变化对其生物学行为的影响。以期在基因功能层面上揭示该单核苷酸多态性对胃腺癌的作用机制,为rs2228226成为胃腺癌的新型生物学标志物提供依据。方法:(1)课题组前期利用DHPLC和质谱分析技术对661例p T4a胃腺癌术后患者的病理组织DNA进行检测,在对rs2228226多态性进行统计及对应患者临床信息完善的基础上设计实验,构建Cox比例风险模型,多因素分析rs2228226多态性与p T4a胃腺癌患者临床预后的关联性,并对化疗分层进行深入探讨;(2)在q PCR技术验证ARHGAP9在胃腺癌细胞株中表达水平的基础上,通过构建敲减ARHGAP9的慢病毒载体,获得ARHGAP9低表达的胃腺癌稳转株,并通过细胞功能实验以验证ARHGAP9对胃腺癌细胞凋亡、细胞周期、增殖、迁移和侵袭的影响。结果:(1)依据课题设计,排除确诊远端转移、失访和其他不符纳入标准的患者,本课题最终筛选463例具有完整资料的患者入组分析,总体SNP分型分别为CC=57例、CG=200例、GG=206例;总体复发转移、死亡例数分别为323例(69.8%)和319例(68.9%);CC基因型患者(MDFS=12 months,MOS=27months)中位无病生存时间和中位生存时间显著短于CG/GG基因型的患者(MDFS=19 morths,Log-rank p=0.003;MOS=35 morths,Log-rank p=0.002);在接受化疗患者分层研究中,CC基因型、高龄、淋巴结转移、中分化程度和未能达到R0切除是肿瘤复发转移的独立危险因素(p<0.05),而CC基因型、淋巴结转移和肿瘤复发转移则是患者死亡的独立危险因素(p<0.05)。(2)本试验q PCR结果表明,ARHGAP9在胃腺癌细胞株中表达显著高于正常胃黏膜细胞株的表达水平(p<0.05);抑制ARHGAP9表达可显著降低胃腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力(pC)中,突变纯合子(CC)是导致p T4a胃腺癌术后化疗患者复发转移及死亡的独立危险因素,可作为判断胃腺癌术后化疗患者预后的潜在标志物;胃腺癌细胞中ARHGAP9表达量升高,抑制胃腺癌细胞中的ARHGAP9表达,可抑制其肿瘤生物学行为。
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