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目的:本研究采用高胆固醇致石饲料诱发CS(cholesterol stone,CS)小鼠模型,予龙胆泻肝汤进行干预,比较不同组别小鼠胆固醇、胆汁酸等浓度变化以及与胆固醇吸收密切相关的尼曼-匹克C1样蛋白1(Niemann-Pick type C1 Like 1,NPC1L1)、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G5/G8(ATP-binding cassette transportersG5/G8,ABCG5/ABCG8)的表达变化,从胆固醇代谢角度研究CS湿热证的分子生物学基础。方法:6周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠32只,随机分为空白组8只,造模组24只。采用高胆固醇致石饲料诱导法复制CS小鼠模型,在造模8周后,随机选取8只模型小鼠进行取材,观察胆囊结石模型是否成功。将成模小鼠随机分为模型组与龙胆泻肝汤组,龙胆泻肝汤组予龙胆泻肝汤干预,模型组与空白组予等体积生理盐水干预,分别干预4周。以空白组作为对照,观察各组小鼠的胆囊形态,用HE染色法观察各组小鼠的肝脏与小肠的组织形态;用ELISA法检测血清胆固醇(Total cholesterol,TC)与甘油三酯(Triglyceride,TG),胆汁胆固醇与胆汁酸(Total biliary acid,TBA)含量;分别用q-PCR法与Western blot法检测小鼠NPC1L1、ABCG5/G8的mRNA与蛋白表达水平。结果:1.一般情况比较:造模期间模型组小鼠体质量增长速率较空白组快且体重显著性高于空白组(P<0.01),而饮食及饮水量较空白组显著下降(P<0.01),经龙胆泻肝汤干预后小鼠体质量增长速度减缓,体重较空白组显著下降(P<0.01)。2.镜下显示结果体视显微镜下:空白组小鼠胆囊清亮,模型组小鼠胆囊较空白组增大,胆汁混浊,有絮状物沉淀,龙胆泻肝汤组较空白组混浊,而较模型组清澈。显微镜下:空白组小鼠肝组织中肝细胞排列呈索状,结构正常,小肠粘膜结构完整,轮廓清晰,刷状缘排列整齐规则,肌层较薄;模型组小鼠肝组织中脂肪粒明显,央静脉附近肝细胞排列杂乱,小肠组织绒毛结构有所损坏,肠绒毛排列紊乱,肌层有所增厚;龙胆泻肝汤组小鼠肝组织脂肪泡减少减小,小肠肠绒毛紊乱情况改善,肌层厚度有所降低。3.血脂与胆汁含量:与空白组比较,模型组血清中TC与胆汁TC、TBA水平显著升高(P<0.01),而血清中TG升高不明显(P>0.05)。与模型组比较,龙胆泻肝汤组血清中TC与胆汁TC、TBA水平显著下降(P<0.01),而血清中TG下降明显(P<0.05)。4.胆固醇代谢相关基因mRNA表达:与空白组比较,肝组织中ABCG5/G8与小肠组织中NPC1L1表达显著上升(P<0.01),而肝组织NPC1L1与小肠组织中ABCG5/G8表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,龙胆泻肝汤组肝组织中ABCG5与小肠组织中NPC1L1表达显著下降(P<0.01),肝组织中ABCG8下降明显(P<0.05),而肝组织NPC1L1与小肠组织中ABCG5/G8表达显著上升(P<0.01)。5.胆固醇代谢相关基因蛋白表达:与空白组比较,肝组织中ABCG5表达显著上升(P<0.01),肝组织中ABCG8与小肠组织中NPC1L1表达明显上升(P<0.05),而肝组织NPC1L1与小肠组织中ABCG5/G8表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,龙胆泻肝汤组肝组织中ABCG5下降显著(P<0.01),肝组织中ABCG8与小肠组织中NPC1L1表达下调,但下降不明显(P>0.05),而肝组织中NPC1L1与小肠组织中ABCG5/G8表达上调,但上升不明显(P>0.05)。结论:1.胆囊胆固醇结石中肝组织的脂肪变与小肠粘膜结构的受损可能是湿热证发生的病理形态学改变。2.血脂水平紊乱、胆汁盐成分比例失调可能是湿热证发生的分子生物学基础之一。3.胆囊胆固醇结石中胆固醇代谢相关基因ABCG5、ABCG8、NPC1L1表达变化引起的胆固醇代谢异常是湿热证的分子生物学基础之一。