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猪繁殖与呼吸综合征作为一种高度接触性传染病,由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)引起。该病的主要特征是母猪繁殖障碍,仔猪呼吸道症状及断奶仔猪高死亡率。其在世界范围内的流行,给世界各国的养猪业造成了沉重的打击。特别是2006年我国南方省份暴发的PRRSV变异株引起的“猪高热病”给我国的养猪业造成巨大的经济损失。
本研究对广西2008-2010年送检的1689份样品进行检测,阳性样品一共411份,阳性率达到24.3%,其中变异株295株,阳性率为17.5%;传统株37株,阳性率为2.2%;混合感染79株,阳性率为4.7%。在PRRSV阳性中,变异株所占比重为71.8%,传统株所占比重为9%,混合感染所占比重为19.2%。筛选部分PRRSV阳性样品,进行Nsp2基因全长的扩增及序列比对分析,总共获得35个Nsp2全长基因,其核苷酸同源性为89.7%-99.7%,与VR-2332的同源性为80.5%-83.7%,与CH-1a的同源性为89.6%-92.3%,与JXA1的同源性为92%-99.3%;Nsp2基因间推导的氨基酸同源性为84.8%-99.7%,与VR-2332的同源性分别为74.5%-78%,与CH-1a的同源性分别为84.4%-88.4%,与JXA1的同源性分别为88.2%-99.1%。Nsp2基因推导的氨基酸位点变异分析表明,与美洲型代表毒株VR-2332相比,35个序列中,有32个Nsp2推导氨基酸序列在481位和533-561位共同发生了不连续的30个氨基酸缺失,其中GXNN03-2010在12-14位额外缺失了3个氨基酸,GXNN01-2009、GXNN02-2009在485-488位额外缺失4个氨基酸。另外,GXNN07-2009在468位缺失1个氨基酸。核苷酸序列系统进化树分析表明,本研究所得35个Nsp2基因主要分属以HB-1为代表的亚群3和以JXA1为代表的亚群4。
通过病毒分离,本研究获得GX59-2008、GX12-2009两株HP-PRRSV,全基因组测序表明,GXNN59-2008基因组全长为15332bp,GXNN12-2009基因组全长为15325bp,2株间全基因组核苷酸序列的同源性为98%,与LV株的同源性分别为60.7%、60.6%,与VR-2332的同源性分别为89.5%、88.9%,与JXA1的同源性分别为98.9%、98.3%。通过全基因组主要氨基酸位点分析,本研究所得2个毒株均属于野毒株。9个毒力相关氨基酸位点除了发生与HP-PRRSV一致的ORF3G83→S83外,其余8个均未发生变异。基因组进化树分析可知,这2个毒株均属于HP-PRRSV。