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目的：慢性粒细胞白血病（CML）是由于多能造血干细胞突变引起的克隆性恶性增殖性疾病。在中国，CML的发病率约为0.36/10万人口，仅次于急性粒细胞白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病(ALL)。随着分子生物技术的发展，慢性粒细胞白血病的机理逐渐被了解。其中约95%的CML患者有t(9,22（)q34;q11）染色体核型，既Ph染色体，形成BCR/ABL融合基因，编码P210蛋白，能增强酪氨酸激酶活性，从而抑制细胞凋亡。研究表明，PI3K信号通路作为BCR/ABL下游很重要的信号通路，发挥重要作用。SHIP(肌醇5’-磷酸酶SH2domain containing inositol5′-phosphatase，SHIP，属于PIPase家族）基因是继PTEN基因后发现的，仅在造血细胞表达的，一种新的肌醇磷酸酶，通过降解PIP3，负调控PI3K/Akt信号通路。本研究组前期研究显示：急性白血病患者存在SHIP基因突变，SHIP基因低表达与人白血病细胞恶性增殖有关，SHIP基因可以诱导K562细胞凋亡；BCR/ABL可以被甲磺酸伊马替尼封闭，从而上调SHIP蛋白表达水平。尽管伊马替尼有积极的作用，但使用此药的近20%的患者没有完全的细胞遗传学反应，而部分患者可能存在难以忍受的副作用或耐药性。所以，寻找一种新型的治疗慢粒的药物是必要的。硼替佐米是目前临床可以使用的蛋白酶体抑制剂，主要应用于治疗复发、难治的多发性骨髓瘤。硼替佐米与其他抗肿瘤药物联合应用，在多种恶性肿瘤显示了抑制作用，应用前景广阔。目前，硼替佐米的作用机制尚未完全清楚。本研究采用硼替佐米与阿糖胞苷，单药及不同联合方式作用于K562细胞，观察抑制率，凋亡率，检测SHIP基因，mTOR基因及NF-κB基因的变化，探讨作用机制，为CML的治疗寻找新的方法。方法：研究对象为人慢性粒细胞白血病细胞株K562。将K562细胞株完全随机分成6个处理组，分别为1对照组；2硼替佐米处理组，处理48小时；3阿糖胞苷处理组，处理48小时。4硼替佐米处理6小时后序贯给予阿糖胞苷，共48小时；5阿糖胞苷处理6小时后给予硼替佐米，共48小时6同时给予硼替佐米和阿糖胞苷，共48小时。①应用MTT法检查各组细胞增殖抑制率，②应用流式细胞术检测凋亡率，③应用聚合酶链式反应（PCR）检测相关基因表达量的变化.④用SPSS13.0进行统计学处理，应用单因素方差分析，多处理组均数间多重比较，SNK法，检验水准0.05.结果：1MTT检测抑制率结果显示:单药与联合用药都可以抑制细胞增殖率。在一定范围内与药物浓度与时间存在正相关关系。联合作用优于单独作用，其中先用阿糖胞苷处理再给予硼替佐米（Ara-C→BTZ）处理做抑制作用最强，为86.46%。其次为同时处理组（Ara-C+BTZ）和先硼替佐米后阿糖胞苷（BTZ→Ara-C），约为62.2%，阿糖胞苷预处理组与同时组及硼替佐米均存在统计差异，P<0.05。单药组约为46%，单药组间不存在统计学差异。2流式细胞仪检测凋亡结果显示:单药与联合用药都可以使凋亡率增加。联合用药作用优于单药，凋亡率联合组：（Ara-C→BTZ）组为（84.26±.2.94）%；（Ara-C+BTZ）组（69.57±3.64）%；（BTZ→Ara-C）组（62.21±.1.35）%，P<0.05。单药组分别为（24.01±1.84）%和（20.93±2.93）%，P>0.05单药组内不存在统计差异。3PCR检测SHIP，mTOR，NF-κB基因结果显示：硼替佐米与阿糖胞苷均可以使SHIP基因表达量上调，联合作用优于单药作用（BTZ：1.1209±0.0776；Ara-C：0.9709±0.2747，单药组间不存在统计学差异；Ara-C+BTZ：2.5348±0.13787；BTZ→Ara-C；2.2189±.0.3229；Ara-C→BTZ:2.4019±.0.3067，联合组间不存统计学差异。对照组0.3141±.0.0822。单药组，联合组，对照组三组间存在统计学差异）。mTOR基因表达量下降（对照组2.1053±.0.0967，Ara-C:1.3253±0.0448;BTZ：1.1863±0.0247;Ara-C+BTZ：0.8623±0.0725；BTZ→Ara-C：0.7353±.0.0673；Ara-C→BTZ:0.8703±.0.0556联合组间不存在统计学差异，联合组与单药组，对照组三组间存在统计学差异）。NF-κB基因表达下调，联合作用优于单药作用，以阿糖胞苷预处理组下调最显著。（依次为Ara-C：2.1386±0.01102；BTZ：1.8715±0.0.043； BTZ→Ara-C：1.2418±.0.0429； Ara-C+BTZ：1.0170±0.08411；Ara-C→BTZ：0.7104±.0.0235，各处理组间均存在统计学差异（P<0.05）结论：硼替佐米与阿糖胞苷均可以抑制K562细胞增殖，诱导细胞凋亡。联合作用优于单药作用，其中，又以（Ara-C→BTZ）处理方式作用最优，其机制可能与通过影响上调SHIP基因，下调mTOR基因及NF-κB基因表达水平而影响PI3K信号通路有关。