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目的研究PH结构域且富含亮氨酸重复基序的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶1(pleckstrin homology domain leucine-rich repeat protein phosphatase 1,PHLPP1)在胃癌组织以及相对应癌旁非肿瘤组织中的表达水平及变化;探讨PHLPP1蛋白表达水平与胃癌临床病理特征之间的关系;另外,通过检测不同人胃癌细胞系(AGS,SUN-1,KATO-III,BGC-823,MGC-803,SGC-7901和HGC-27)和人正常胃黏膜细胞系(GES-1)PHLPP1 mRNA和蛋白的表达情况及差异,进一步明确PHLPP1在人胃癌细胞系及人正常胃黏膜细胞中的表达情况。根据完整的临床随访资料,分析135例行胃癌根治术后患者中PHLPP1蛋白的表达情况与预后之间的关系。方法收集来自天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科于2004年08月至2007年12月收治并经根治手术切除,通过病理证实为胃癌的135例患者的癌组织以及相对应癌旁非肿瘤组织石蜡标本,送往上海芯超生物科技有限公司制作组织芯片(编号:T14-501 TMA1-3)。应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法检测135例胃癌患者的癌组织及其相对应癌旁非肿瘤组织中PHLPP1蛋白的表达情况;分析PHLPP1蛋白表达水平与胃癌临床病理特征及预后之间的关系。采取半定量逆转录聚合酶链反应(Semi-quantitative reverse transcription and polymerase chain react,SqRT-PCR)技术检测不同人胃癌细胞系及人正常胃黏膜细胞系中PHLPP1 mRNA的表达水平;Western blot(WB)法检测不同人胃癌细胞系与人正常胃黏膜细胞系中PHLPP1蛋白的表达情况。结果1、135例胃癌组织标本中PHLPP1蛋白阳性表达率为55.6%,相对应癌旁非肿瘤组织中PHLPP1蛋白阳性表达率为87.4%,差别具有统计学意义(P<0.05)。2、SqRT-PCR技术检测不同人胃癌细胞系PHLPP1 mRNA的表达水平均低于人正常胃黏膜细胞系(P<0.05);WB法检测不同人胃癌细胞系PHLPP1的蛋白表达水平也均低于人正常胃黏膜细胞系的表达(P<0.05)。3、对135例胃癌根治术后患者进行单因素生存分析表明:肿瘤大小、N分期、PHLPP1蛋白的表达水平与胃癌患者根治术后的预后相关(P<0.05);COX模型分析表明PHLPP1蛋白的表达和N分期是胃癌根治术后患者的独立预后因素(P<0.05)。结论1、胃癌组织中PHLPP1蛋白表达水平低于相对应癌旁非肿瘤组织;且人胃癌细胞系PHLPP1表达在mRNA及蛋白水平均也低于人正常胃黏膜细胞系。提示PHLPP1的低表达或表达沉默与胃癌的发生发展密切相关,由此推测PHLPP1在胃癌可能作为一种抑癌基因。2、PHLPP1蛋白表达水平是胃癌患者根治术后独立的预后因素。PHLPP1蛋白低表达或表达沉默的胃癌患者预后较差,因此可作为预测胃癌预后的因子。