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目的:观察丹参酮ⅡA联合DAPT对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾组织中TRB3(Tribbles同源蛋白3)、Klotho等蛋白表达的影响,深化丹参酮ⅡA联合DAPT防治肾纤维化的疗效机制研究,为其临床应用提供实验依据。方法:40只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组,运用UUO手术准备肾纤维化模型,即假手术组(n=8)、模型组(n=8)、丹参酮ⅡA组(n=8)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(n=8)、丹参酮ⅡA联合DAPT组(简称联合组)(n=8)。造模,药物干预14d。HE染色方法观察各组大鼠肾组织的病理变化情况。免疫组织化学方法检测大鼠肾组织Smad3、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的变化。蛋白免疫印迹法(WB)检测大鼠肾组织Smad7、TRB3、Klotho蛋白的表达。结果:1.HE染色结果:假手术组大鼠肾组织未见明显病理改变,肾小球、肾小管结构正常,无炎症细胞浸润。模型组:肾小球结构紊乱,肾小管萎缩或代偿性扩张,肾小管间质纤维化明显,炎症细胞浸润。各给药组肾脏病理变化均有不同程度减轻,各给药组肾组织HE评分均显著低于模型组(P<0.05),丹参酮ⅡA+DAPT组评分显著低于丹参酮ⅡA组和DAPT组(P<0.05)。2.免疫组化检测肾组织结果:ColⅢ在大鼠肾组织肾间质及肾小管上皮细胞中表达;Smad3在大鼠肾组织肾小球和肾小管上皮细胞表达。模型组肾组织ColⅢ、Smad3较假手术组平均光密度值显著升高(P<0.05);丹参酮IIA+DAPT组较丹参酮ⅡA组、DAPT组ColⅢ、Smad3平均光密度值降低(P<0.05)。3.Western blot检测肾组织结果:与模型组比较,各给药组肾组织TRB3蛋白相对表达显著降低(P<0.05),Smad7、Klotho蛋白相对表达显著升高(P<0.05),丹参酮IIA+DAPT组肾组织TRB3蛋白相对表达较单一用药组降低(P<0.05),而Smad7、Klotho蛋白相对表达较单一用药组升高(P<0.05)。结论:丹参酮IIA、DAPT及其联合用药可以改善UUO大鼠肾纤维化程度,且联合用药疗效优于单一用药。其机制可能与其降低UUO大鼠肾组织Smad3、TRB3蛋白表达,增加Smad7、Klotho蛋白,减少Ⅲ型胶原蛋白的合成有关。